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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 蛋白怎么溶解在有机溶剂中呢~
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jialy2011

金虫 (著名写手)

[求助] 蛋白怎么溶解在有机溶剂中呢~

跪求~各位大神~有没有什么办法能让蛋白溶解在有机溶剂中呢~
需要加入些什么东西呢~
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jialy
1楼 2012-12-22 20:52:57
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dshlove

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
jialy2011: 金币+5, ★有帮助 2013-03-28 15:08:51
引用回帖:
4楼: Originally posted by jialy2011 at 2012-12-24 23:00:41
谢谢的呢~我想用的是溶菌酶~写的是它比较耐有机溶剂的~想把它溶解在乙腈里~可是不理想的~所以就想能不能加一些类似于非离子表面活性剂之类的~把它溶解了~可是不太好呀~...

我一般做蛋白的质谱时候都是在流动相中加乙腈和0.1%甲酸，蛋白还不怎么粘柱子，所以我觉得，乙腈加0.5%甲酸或者TFA就已经能溶解大部分的蛋白了。
当然可能有特例啊。一切还得你试试才知道。
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7楼2012-12-25 13:20:11
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snoopyzxx

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
jialy2011: 金币+5 2012-12-24 23:01:57
要做RP-HPLC还是用反相填料纯化蛋白？
很多蛋白可以溶解在低浓度有机试剂中的。高浓度会导致沉淀吧。
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VX：19192310212；公众号：生物技术与IVD
2楼2012-12-22 23:43:19
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dshlove

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+3, 鼓励应助 2012-12-24 18:57:27
jialy2011: 金币+20 2012-12-24 23:02:17
jialy2011: 金币+20, ★有帮助 2013-03-28 15:09:10
对于一些小肽来说，可以认为是没有活性的，所以一般常见的乙腈就可以溶解。
但是对一些大分子的蛋白，三级结构比较复杂的话，用有机相去溶解的话可能会失活，因为你之前是在水相里的，蛋白表面是亲水基团，一旦进入有机相可能会导致亲水基团的内置。
所以，你要先考虑你溶解之后的活性问题，再考虑要不要溶解。
至于溶解，如果只是单纯的溶解，试试乙醇，还有乙腈或者DMSO，加0.1%的甲酸或TFA。
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3楼2012-12-24 09:46:49
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jialy2011

金虫 (著名写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by dshlove at 2012-12-24 09:46:49
对于一些小肽来说，可以认为是没有活性的，所以一般常见的乙腈就可以溶解。
但是对一些大分子的蛋白，三级结构比较复杂的话，用有机相去溶解的话可能会失活，因为你之前是在水相里的，蛋白表面是亲水基团，一旦进入 ...

谢谢的呢~我想用的是溶菌酶~写的是它比较耐有机溶剂的~想把它溶解在乙腈里~可是不理想的~所以就想能不能加一些类似于非离子表面活性剂之类的~把它溶解了~可是不太好呀~
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jialy
4楼2012-12-24 23:00:41
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