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123456qi

木虫 (职业作家)
引用回帖:
8楼: Originally posted by xiaochong98 at 2012-12-19 13:27:20
看起来像是大分子的结晶，sitting drop表示采用座滴法.

应该是大分子，做的是共结晶，我想做其中小分子化合物的单晶，不知能看出是什么条件吗？谢谢！
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11楼2012-12-19 19:08:21
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xiaochong98

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
123456qi: 金币+5, ★有帮助, 谢谢了！ 2012-12-20 09:58:02
看来你没有做过蛋白结晶，简单的说，现在大分子结晶有两种方式，一是悬滴法，一是座滴法，现在已经有商用结晶试剂出售，有96套的，64套的，可以订购，也可以自己配，买来后将样品按照其性质配成一定浓度，加入相应的结晶试剂，用凡士林封口，放置析晶。如果是小分子，可以选用溶剂挥发法，样品溶在单一溶剂或混合溶剂中，封口模封口，放置等溶剂挥发析晶。
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北京人
12楼2012-12-20 09:19:15
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123456qi

木虫 (职业作家)
引用回帖:
12楼: Originally posted by xiaochong98 at 2012-12-20 09:19:15
看来你没有做过蛋白结晶，简单的说，现在大分子结晶有两种方式，一是悬滴法，一是座滴法，现在已经有商用结晶试剂出售，有96套的，64套的，可以订购，也可以自己配，买来后将样品按照其性质配成一定浓度，加入相应的 ...

非常感谢！我是想做个小分子的（以前没做过，一点也不懂），但相关文献好像都是共结晶的，用的是蒸汽扩散法，看不出来是怎么操作的，例如下面：
Compounds were dissolved in Me2SO to a
final concentration of 20 mM and then mixed with c-Met protein
to a finalMe2SOconcentration of 4% before crystallization.
Crystals of compounds were grown from 12% polyethylene glycol
6000, 1.0 M LiCl2, and 0.1 M sodium citrate, pH 5.0. Large crystals
suitable for data collection were obtained by microseeding.
可否告诉我具体什么意思吗？
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13楼2012-12-20 09:57:45
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123456qi

木虫 (职业作家)
引用回帖:
12楼: Originally posted by xiaochong98 at 2012-12-20 09:19:15
看来你没有做过蛋白结晶，简单的说，现在大分子结晶有两种方式，一是悬滴法，一是座滴法，现在已经有商用结晶试剂出售，有96套的，64套的，可以订购，也可以自己配，买来后将样品按照其性质配成一定浓度，加入相应的 ...

Following centrifugation, equal volumes of supernatant and reservoir
solution (12% PEG-4000 and 15% isopropanol) were mixed and crystals
obtained by vapor diffusion.还有这个，是配成12%的聚乙二醇4000和15%异丙醇水溶液，再将其加入至离心液里吗，要是这样用蒸汽扩散法得用什么不良溶剂啊，文献上没提得自己找吗？
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14楼2012-12-20 10:03:59
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xiaochong98

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
123456qi: 金币+5, ★有帮助 2012-12-20 16:46:29
小分子的不用那么麻烦：
1、样品的溶解性能如何，在那些常用溶剂中易溶，那些溶剂中不溶，
2、选择合适的溶剂，比如甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯、二氧六环、等等溶解样品，必须将样品完全溶解，溶液澄明。必要时可以稍加热。但温度不要过高。
3、可以调配混合溶剂，两种方式，一是用易溶溶剂溶解，滴加不溶溶剂至溶液稍微有浑浊后加少量易溶溶剂至溶液澄明，二是将易溶溶剂与不溶溶剂配制一定的比例加入到样品中至溶液澄明，然后用封口模封口置于安静、避光，一定温度的环境中等待溶剂挥发，晶体自然析出。
4、有晶体出现，你撞了大运
5、没有晶体出现，继续调整溶剂系统，耐心等待，。。。。。
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北京人
15楼2012-12-20 16:26:59
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