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jackyoung

新虫 (正式写手)

设计策略的时候能不能尽量避开这种情况?效率太低

发自小木虫Android客户端
CestLaVie
11楼2016-01-15 20:04:12
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那雨那女孩

新虫 (小有名气)

引用回帖:
11楼: Originally posted by jackyoung at 2016-01-15 20:04:12
设计策略的时候能不能尽量避开这种情况?效率太低

恩,现在找到方法了,谢谢
辟邪
12楼2016-01-17 17:41:53
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几氧化氮

新虫 (初入文坛)

实在不行可以做cloneEZ
13楼2016-10-23 16:36:26
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781055707

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

你可以在你的目的片段的引物上加平末端酶切位点,这样就不用多一步末端补平了,分子实验,操作步骤不要太多,能简就减。
采菊东篱下,悠然见南山。
14楼2017-05-04 08:44:58
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781055707

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
10楼: Originally posted by 那雨那女孩 at 2016-01-15 18:08:06
就是用平末端连接后,目的基因和载体之间会不会多出来的碱基(除了补平,会不会多加碱基),平末端连接是不定向的吗?之后该怎么筛选?大神...

筛选只能是测序。你也可以在目的片段的正向引物上加酶切位点XHOL1,然后用质粒上的酶切位点nde1。双酶切后
————nde1————XHOL                                                        正向连入就只能切出10几BP。                                          

————nde1————————————————————XHOL    反向连入就能切出和目的片段一样大小的序列。
采菊东篱下,悠然见南山。
15楼2017-05-04 15:21:40
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