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小丹木木

荣誉版主 (著名写手)

还好吧,想当年,我第一次做就成功了
11楼2012-12-17 15:38:33
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stewart3261

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
10楼: Originally posted by porphybaby at 2012-12-17 14:43:45
就是,我们学校另一个课题组他们有做过跟我所需要的完全一样的蛋白的RT-PCR,而且已经做得很成熟。引物就跟他们一样的。

只是我们是化学和药学的,而我师姐去生物那边做RT,他们的过程就会繁琐得多。尤其是,他 ...

纯化应该是rna含量比较低吧!用TRIZOL完全可以满足实验要求!只是相对定量,纯化就太繁琐了!
12楼2012-12-18 09:17:29
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porphybaby

金虫 (正式写手)

引用回帖:
12楼: Originally posted by stewart3261 at 2012-12-18 09:17:29
纯化应该是rna含量比较低吧!用TRIZOL完全可以满足实验要求!只是相对定量,纯化就太繁琐了!...

噢。。。那就简单多了。

想问下,Trizol提RNA的时候,是否要在超净台中进行啊?

我看网上的视频,好像都不用的哦,都在外面的台子上做~~
13楼2012-12-18 09:37:08
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德国工兵铲

金虫 (小有名气)

说起来过程是很简单的,不过说首先提RNA就因人而异,有人就是提不出来。其次RT-PCR灵敏度很好,对操作要求挺高的,很容易污染。

这两点都是挺靠人品的东西。
14楼2012-12-18 09:56:45
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stewart3261

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
13楼: Originally posted by porphybaby at 2012-12-18 09:37:08
噢。。。那就简单多了。

想问下,Trizol提RNA的时候,是否要在超净台中进行啊?

我看网上的视频,好像都不用的哦,都在外面的台子上做~~...

有最好,没有外面也可以,我们就是在外面实验台做的!不过一定要仔细,仔细,再仔细!
15楼2012-12-18 11:43:56
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porphybaby

金虫 (正式写手)

引用回帖:
15楼: Originally posted by stewart3261 at 2012-12-18 11:43:56
有最好,没有外面也可以,我们就是在外面实验台做的!不过一定要仔细,仔细,再仔细!...

说得我好怕。

其实我就是想搞一个那样的地方,但不知怎么设计。因为我们很多仪器不在同一个区域。比如离心机、涡旋机、超净台、紫外定量,PCR机器,都不在同一个地方。。
16楼2012-12-18 14:52:47
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stewart3261

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
16楼: Originally posted by porphybaby at 2012-12-18 14:52:47
说得我好怕。

其实我就是想搞一个那样的地方,但不知怎么设计。因为我们很多仪器不在同一个区域。比如离心机、涡旋机、超净台、紫外定量,PCR机器,都不在同一个地方。。...

没有那么恐怖,刚开始你一定要仔细小心
后来慢慢的熟悉了,你就知道什么地方可以粗放,什么地方一定要小心了!
17楼2012-12-19 09:52:38
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scird

金虫 (小有名气)

以前有个牛人说过, PCR太难了。
http://gmo.cnbabyup.com
18楼2013-01-17 12:25:48
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