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张香玲1017

铁杆木虫 (著名写手)

冷夜雨

[求助] 大肠杆菌怎么纯化

需要有经验的给于帮助,做转化用的大肠杆菌,最近发现菌种不是很纯,有比所需要的菌(大肠杆菌)个头大点的菌体(大个的长杆菌)、也有菌丝状的东西(显微镜观察能看到一到二根菌丝状的,没有菌球或团,可能是霉菌类的吧)、,平板分过两次,整个平板上(10-5)长出4个菌落,挑其中一个做镜检还是有其它杆菌和菌丝状的东西,请问用什么方法能纯化一下,非常感谢
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希望大家多多交流。
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czdaeq

铜虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
scelab: 金币+6, 谢谢交流 2012-12-20 20:26:45
纯化方法很简单:挑取划线的平板上的单菌落(注意,这里虽然是单菌落,但是并不意味着它就一定是由单细胞发育而来),试管培养,待OD600涨至1(微生物书告诉我们,对于E。coli 1 0D=10的8-9次方个细胞)左右,使用生理盐水做10的5、6、7、8稀释被数,并各取100ul涂布2个平板(共8个),那么预计在10的6、7平板能得到50个左右单菌落(这个就能比较肯定是由单细胞发展而来的啦,因为理论上那100ul涂布液中也就只含有50个左右细胞啦)
11楼2012-12-20 20:19:22
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herway

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
张香玲1017: 金币+2 2013-02-25 10:26:25
请问你的菌是工程菌么?
2楼2012-12-14 15:52:06
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静安jingan

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
张香玲1017: 金币+2 2013-02-25 10:24:53
一般的纯化都是挑取单克隆的啊
让复杂的事情变简单,简单的事情更简单
3楼2012-12-14 19:36:08
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张香玲1017

铁杆木虫 (著名写手)

冷夜雨

引用回帖:
2楼: Originally posted by herway at 2012-12-14 15:52:06
请问你的菌是工程菌么?

是工程菌
希望大家多多交流。
4楼2012-12-15 14:44:59
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