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hellolin

金虫 (小有名气)

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专业: 昆虫学

[求助] 线粒体抽提纯度检测

现在正在抽提细胞的线粒体，抽提buffer：250mM蔗糖，5mM Tris-HCl，2mM EGTA，1%BSA。用玻璃匀浆器匀浆后1000g离心10min，取上清用10000g离心10min。然后用respiration medium洗两次，沉淀用RIPA溶解后做western检测胞质和线粒体的actin。理论上来说线粒体组分应该是没有actin的，但是western现实线粒体组分还有残留着很多actin，是否就说明抽提的线粒体有胞质污染，不够纯？如何改进比较好，能够抽提到更纯的线粒体？

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