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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » pcr测序后发现有重叠现象
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Cllair

金虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by cicelyzh at 2012-12-13 08:09:53
即使如此，单克隆里面只能是一个序列，拿去测序正确就可以了。...

目前测序很多次了，每次都自信满满的送过去，然后结果都是一样有重叠现象而没有测序结果。
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有今生没来世，且行且珍惜。
11楼2012-12-14 16:18:39
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Cllair

金虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by shsDerek at 2012-12-13 08:28:50
换引物和酶试试，模板没问题的话就应该是这个问题，换个 高保真度的酶

用的takara的酶，这个酶保真度应该还可以吧？
引物，，，我很想换，但是我目前没有更多的资料可以设计出新的引物来。。。
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有今生没来世，且行且珍惜。
12楼2012-12-14 16:19:58
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Cllair

金虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by joan198108 at 2012-12-14 14:32:37
两种可能：模板本身不纯；引物特异性不高。最近我碰到过后面情况，换引物后解决了。

单纯的根据基因库资料设计的引物，其实p基因的时候成功率就很低。现有资料引物就只能设计到这个水平了。。。
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13楼2012-12-14 16:26:52
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追梦的人1987

金虫 (小有名气)
引用回帖:
10楼: Originally posted by Cllair at 2012-12-14 16:16:58
回收时只看到一条带。。。...

果断的连载体测序吧
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14楼2012-12-14 19:34:53
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
11楼: Originally posted by Cllair at 2012-12-14 16:18:39
目前测序很多次了，每次都自信满满的送过去，然后结果都是一样有重叠现象而没有测序结果。...

你确定挑的单克隆吗？第一次听说克隆之后还是重叠的。
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15楼2012-12-15 07:15:12
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Cllair

金虫 (小有名气)
引用回帖:
14楼: Originally posted by 追梦的人1987 at 2012-12-14 19:34:53
果断的连载体测序吧...

送测序了，期待结果呢。
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有今生没来世，且行且珍惜。
16楼2012-12-15 18:18:01
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Cllair

金虫 (小有名气)
引用回帖:
15楼: Originally posted by cicelyzh at 2012-12-15 07:15:12
你确定挑的单克隆吗？第一次听说克隆之后还是重叠的。...

确定，已经不知道第几次确定了，测序很多次，依然有重叠。。。
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有今生没来世，且行且珍惜。
17楼2012-12-15 18:19:24
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追梦的人1987

金虫 (小有名气)
引用回帖:
16楼: Originally posted by Cllair at 2012-12-15 18:18:01
送测序了，期待结果呢。...

希望顺利啊！！
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18楼2012-12-15 18:29:21
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Cllair

金虫 (小有名气)
引用回帖:
18楼: Originally posted by 追梦的人1987 at 2012-12-15 18:29:21
希望顺利啊！！...

19楼2012-12-15 19:34:55
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