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午夜的月光

铜虫 (初入文坛)


[交流] 目的基因表达蛋白两亚基染色后亮度不同原因

我用大肠杆菌表达了一个目的蛋白,这个目的蛋白含有大小不同的两个亚基,用同一个启动子转录,信使RNA形式为:启动子-大亚基-启动子-小亚基。蛋白胶染色后发现,小的亚基条带明显比大的亚基条带颜色浅,这正常不?
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午夜的月光(金币+1): 谢谢参与
另外有一种可能是,你的小亚基表达更多,整个蛋白的大小亚基之比不是1:1,如果进一步纯化,除掉多余的小亚基。
6楼2012-12-11 10:22:00
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)



午夜的月光(金币+1): 谢谢参与
你用的是考染吗?考马斯亮蓝对疏水性蛋白的染色效果不如亲水蛋白好,可能你的小亚基疏水性更强?
2楼2012-12-10 14:51:25
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午夜的月光

铜虫 (初入文坛)


引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2012-12-10 14:51:25
你用的是考染吗?考马斯亮蓝对疏水性蛋白的染色效果不如亲水蛋白好,可能你的小亚基疏水性更强?

是用的考染,两亚基染色效果差别非常大啊
3楼2012-12-10 15:06:07
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)


引用回帖:
3楼: Originally posted by 午夜的月光 at 2012-12-10 15:06:07
是用的考染,两亚基染色效果差别非常大啊...

这很正常,有些疏水性强的蛋白在考染下很模糊的,根本不成清晰条带。
5楼2012-12-11 08:28:54
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