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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 目的基因表达蛋白两亚基染色后亮度不同原因
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午夜的月光

铜虫 (初入文坛)

[交流] 目的基因表达蛋白两亚基染色后亮度不同原因

我用大肠杆菌表达了一个目的蛋白，这个目的蛋白含有大小不同的两个亚基，用同一个启动子转录，信使RNA形式为：启动子-大亚基-启动子-小亚基。蛋白胶染色后发现，小的亚基条带明显比大的亚基条带颜色浅，这正常不？
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1楼 2012-12-10 14:27:45
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 午夜的月光 at 2012-12-10 15:06:07
是用的考染，两亚基染色效果差别非常大啊...

这很正常，有些疏水性强的蛋白在考染下很模糊的，根本不成清晰条带。
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5楼2012-12-11 08:28:54
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)
★
午夜的月光(金币+1): 谢谢参与
你用的是考染吗？考马斯亮蓝对疏水性蛋白的染色效果不如亲水蛋白好，可能你的小亚基疏水性更强？
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2楼2012-12-10 14:51:25
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午夜的月光

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2012-12-10 14:51:25
你用的是考染吗？考马斯亮蓝对疏水性蛋白的染色效果不如亲水蛋白好，可能你的小亚基疏水性更强？

是用的考染，两亚基染色效果差别非常大啊
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3楼2012-12-10 15:06:07
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pennchem

专家顾问 (正式写手)
★
午夜的月光(金币+1): 谢谢参与
另外有一种可能是，你的小亚基表达更多，整个蛋白的大小亚基之比不是1：1，如果进一步纯化，除掉多余的小亚基。
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6楼2012-12-11 10:22:00
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