24小时热门版块排行榜    

查看: 11422  |  回复: 13

lihuahan

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
9楼: Originally posted by zhonglin88 at 2014-03-27 19:51:18
你好,我想知道,我用的是pET28a,酶切位点时SacI和HindIII,表达的蛋白会带上His标签么?...

你好,也在做原核表达,想请教一下:1.表达载体应该怎么选择尼?后期是要用纯化目的蛋白做抗体的,pET-22,pET-28,pET-30,我应该怎么选择尼?他们各自有什么优缺点?
2.需要做融合表达的,N-端表达和C-端表达各有什么优缺点?

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
11楼2014-04-30 20:21:30
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

admission

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

一般用引物设计就可以了吧,设计引物的时候把6个his加上去,再加上蛋白部分序列,再加个酶切位点基本上就可以了吧
12楼2014-11-27 23:22:48
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

maggie3277

木虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by juanzi7229 at 2012-12-10 10:12:45
我们都是通过设计引物的方式,反向引物在终止密码子前加上6个ATG就行了,这样既方便蛋白表达后的纯化,也方便检测是否成功表达。

这样设计以后引物会很长,会影响退火温度之类的吗
13楼2015-01-05 00:05:34
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

781055707

木虫 (著名写手)

两种都行吧,怎么方便怎么来。
采菊东篱下,悠然见南山。
14楼2015-01-05 17:13:49
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 shizishanshang 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] [复试调剂]西南科技大学国防/材料导师推荐 +3 尖角小荷 2026-03-16 6/300 2026-03-16 23:21 by 尖角小荷
[文学芳草园] 伙伴们,祝我生日快乐吧 +17 myrtle 2026-03-10 26/1300 2026-03-16 18:32 by 青橙Ln
[考研] 333求调剂 +3 文思客 2026-03-16 7/350 2026-03-16 18:21 by 文思客
[考研] 0703一志愿211 285分求调剂 +5 ly3471z 2026-03-13 5/250 2026-03-16 16:16 by 哦哦123
[考研] 344求调剂 +3 knight344 2026-03-16 3/150 2026-03-16 09:42 by 无际的草原
[考研] 机械专硕调剂 +3 笨笨兔子 2026-03-12 3/150 2026-03-15 20:02 by 栗子粥?
[考博] 东华理工大学化材专业26届硕士博士申请 +6 zlingli 2026-03-13 6/300 2026-03-15 20:00 by ryzcf
[考研] 本科南京大学一志愿川大药学327 +3 麦田耕者 2026-03-14 3/150 2026-03-14 20:04 by 外星文明
[考研] 255求调剂 +3 李嘉慧, 2026-03-12 4/200 2026-03-14 16:58 by 有只狸奴
[考研] 复试调剂 +3 呼呼?~+123456 2026-03-14 3/150 2026-03-14 16:53 by WTUChen
[考研] 0703,333分求调剂 一志愿郑州大学-物理化学 +3 李魔女斗篷 2026-03-11 3/150 2026-03-13 22:24 by JourneyLucky
[考研] 材料与化工求调剂一志愿 985 总分 295 +8 dream…… 2026-03-12 8/400 2026-03-13 22:17 by 星空星月
[考研] 求材料调剂 +5 隔壁陈先生 2026-03-12 5/250 2026-03-13 22:03 by 星空星月
[考研] 工科278分求调剂 +5 周慢热啊 2026-03-12 7/350 2026-03-13 15:49 by JourneyLucky
[论文投稿] 投稿问题 5+4 星光灿烂xt 2026-03-12 6/300 2026-03-13 14:17 by god_tian
[考研] 08食品或轻工求调剂,本科发表3篇sci一区top论文,一志愿南师大食品科学与工程 +3 我是一个兵, 2026-03-10 3/150 2026-03-13 10:21 by Yuyi.
[考研] 研究生招生 +3 徐海涛11 2026-03-10 7/350 2026-03-12 14:26 by 徐海涛11
[考研] 化工0817调剂 +8 灿若星晨 2026-03-10 8/400 2026-03-10 22:44 by 星空星月
[考研] 收调剂 +7 调剂的考研学生 2026-03-10 7/350 2026-03-10 17:57 by 麦茶汤圆
[考研] 一志愿:武汉理工,材料工程,英二数二 总分314 +3 2202020125 2026-03-10 4/200 2026-03-10 13:54 by xiongyaxuan
信息提示
请填处理意见