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zhang_zhan

木虫 (小有名气)

[求助] 大鼠原代肝细胞分离

我最近用灌流法分离原代大鼠肝细胞,每次无钙灌流液灌流后,肝脏变黄,纹理清晰; 胶原酶(1或4型)灌流后,钝性分离,撕开包膜,肝细胞不会散开,离心(50g, 200g以上沉淀里都是细胞碎片)后得到的细胞特别少(30万),请各位指教!最好给我详细的protocol,我的邮箱zhang_zhan518@126.com, 谢谢了!
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dreamerace

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by coco1809 at 2013-01-14 15:37:07
把仔鼠肝脏无菌取出后剪开包膜用镦头的玻璃棒碾压用培养基稀释即可哦,然后将带有细胞悬液的液体转移至培养瓶中让其铁壁培养即可。

怎么个无菌的取法啊?
学无止境
4楼2014-06-11 18:06:38
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ll9999

专家顾问 (文坛精英)

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【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
缩++影: 金币+2, 感谢您的应助 2012-12-07 16:18:07
zhang_zhan: 金币+4, 有帮助, 这些文献我都有啊,照着做,好像不给力啊 2012-12-08 19:14:57
2楼2012-12-06 08:57:15
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coco1809

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
缩++影: 金币+2, 感谢并鼓励应助 2013-01-14 16:01:45
把仔鼠肝脏无菌取出后剪开包膜用镦头的玻璃棒碾压用培养基稀释即可哦,然后将带有细胞悬液的液体转移至培养瓶中让其铁壁培养即可。
3楼2013-01-14 15:37:07
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