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yubin820307

铜虫 (小有名气)

[求助] HPLC柱子平衡问题

做液相平衡柱子的时候老是有倒峰,用甲醇还好,一用乙腈和水(加酸)的混合流动相就有倒峰,这是怎么回事?

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sdqdxhg

金虫 (正式写手)

你应该把用的柱子,流动相,检测器等都说明白了,以便大家帮助你分析。
2楼2007-07-15 10:27:15
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ooops

铜虫 (初入文坛)

进来学习!

提个问题:差不多10年前做过HPLC,记得乙腈常用于反向柱,水这么大的极性溶剂存在的情况下,反向柱还能有用吗?
3楼2007-07-15 10:55:16
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yubin820307

铜虫 (小有名气)

我用的是C18柱,加水是使得它的保留时间后移,利于与其他组分分离。
4楼2007-07-15 11:36:46
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yubin820307

铜虫 (小有名气)

用的是DAD检测器,会不会是灯的寿命问题。
5楼2007-07-15 11:42:10
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znmy17

木虫 (小有名气)

乙腈和水(加酸)的混合流动相就有倒峰是因为进样的溶剂与流动相不完全相符,不是灯的问题,把它们调到尽量相同的时候就不会出现了。
出现倒峰不影响结果的分析。
6楼2007-07-18 15:38:15
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xuyueer

金虫 (正式写手)

由于你说的不是很清楚所以我只能分析多种可能性,但是你说的用甲醇可以,那么就排除了灯的原因.
本人拙见认为有三种可能:
1柱子脏了,用甲醇冲不下来的东西用乙腈冲下来了.建议用100%甲醇冲洗3小时以上
2流动相没有过滤膜,没有达到色谱级.建议将流动相过0.45um滤膜
3考虑是不是电压不稳,或震动造成的.建议连个稳压器,把仪器放在硬朗的台面上再做几次.
7楼2007-07-18 16:04:38
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wanghuangiggs

金虫 (正式写手)

要上进

柱子用完冲洗10分钟
还有可能是你选择的柱子不合适
8楼2007-07-18 16:45:42
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fjc100648

金虫 (小有名气)

建议做之前认真用微孔滤膜过滤。在上柱前要超声一下,最好多超声一下。跑基线能有所改善。
9楼2007-07-18 17:27:53
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147417956

金虫 (正式写手)

兄弟可能是柱子没有冲洗干净,酸在纯的有机溶剂中可能产生了阳粒子
10楼2007-07-18 17:29:42
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