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【悬赏金币】回答本帖问题，作者yubin820307将赠送您 2 个金币

yubin820307

铜虫 (小有名气)

[求助] HPLC柱子平衡问题

做液相平衡柱子的时候老是有倒峰，用甲醇还好，一用乙腈和水（加酸）的混合流动相就有倒峰，这是怎么回事？
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1楼 2007-07-15 09:58:37
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sdqdxhg

金虫 (正式写手)
你应该把用的柱子，流动相，检测器等都说明白了，以便大家帮助你分析。
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2楼2007-07-15 10:27:15
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ooops

铜虫 (初入文坛)
进来学习！

提个问题：差不多10年前做过HPLC，记得乙腈常用于反向柱，水这么大的极性溶剂存在的情况下，反向柱还能有用吗？
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3楼2007-07-15 10:55:16
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yubin820307

铜虫 (小有名气)
我用的是C18柱，加水是使得它的保留时间后移，利于与其他组分分离。
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4楼2007-07-15 11:36:46
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yubin820307

铜虫 (小有名气)
用的是DAD检测器，会不会是灯的寿命问题。
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5楼2007-07-15 11:42:10
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znmy17

木虫 (小有名气)
乙腈和水（加酸）的混合流动相就有倒峰是因为进样的溶剂与流动相不完全相符，不是灯的问题，把它们调到尽量相同的时候就不会出现了。
出现倒峰不影响结果的分析。
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6楼2007-07-18 15:38:15
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xuyueer

金虫 (正式写手)
由于你说的不是很清楚所以我只能分析多种可能性,但是你说的用甲醇可以,那么就排除了灯的原因.
本人拙见认为有三种可能:
1柱子脏了,用甲醇冲不下来的东西用乙腈冲下来了.建议用100%甲醇冲洗3小时以上
2流动相没有过滤膜,没有达到色谱级.建议将流动相过0.45um滤膜
3考虑是不是电压不稳,或震动造成的.建议连个稳压器,把仪器放在硬朗的台面上再做几次.
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7楼2007-07-18 16:04:38
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wanghuangiggs

金虫 (正式写手)

要上进
柱子用完冲洗10分钟
还有可能是你选择的柱子不合适
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8楼2007-07-18 16:45:42
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fjc100648

金虫 (小有名气)
建议做之前认真用微孔滤膜过滤。在上柱前要超声一下，最好多超声一下。跑基线能有所改善。
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9楼2007-07-18 17:27:53
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147417956

金虫 (正式写手)
兄弟可能是柱子没有冲洗干净，酸在纯的有机溶剂中可能产生了阳粒子
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10楼2007-07-18 17:29:42
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