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today521328

新虫 (初入文坛)


[交流] 引物稀释

请教高手:
    我的引物合成报告单上写的是OD值=2,nmol=5.25.请问如何稀释成10pmol/ul的浓度啊!步骤是怎么样的。
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)



today521328(金币+1): 谢谢参与
用525ul水溶解。计算是V=5.25×10-9/(10×10-12/10-6)=5.25×10-4(L)=525ul
2楼2012-12-03 12:29:20
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普通回帖

today521328

新虫 (初入文坛)


引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2012-12-03 12:29:20
用525ul水溶解。计算是V=5.25×10-9/(10×10-12/10-6)=5.25×10-4(L)=525ul

你好!
    能具体解释一下这个公式:V=5.25×10-9/(10×10-12/10-6)=5.25×10-4(L)=525ul吗?也就是各个数字都具体代表什么啊!谢谢!是不是加水的浓度是nmol数的100倍啊!比如,如果是3nmol的话就加300ul水啊!谢谢!
3楼2012-12-03 12:37:49
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hxswdl

至尊木虫 (文坛精英)



today521328(金币+1): 谢谢参与
一般加nmol数的10倍就是52.5ul先稀释成100uM作为母液,以后用再稀释成10uM的工作液用

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
4楼2012-12-03 17:33:28
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joan198108

铁杆木虫 (正式写手)



today521328(金币+1): 谢谢参与
顶楼上。如果引物用量不是很大,还是建议先稀释为100的,取部分稀释为10的工作浓度,既可以避免反复冻融还可以防止污染。

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5楼2012-12-03 18:02:51
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neu234

木虫之王 (文学泰斗)



today521328(金币+1): 谢谢参与
帮顶
6楼2012-12-03 19:32:16
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天空2011

铜虫 (小有名气)



today521328(金币+1): 谢谢参与
引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2012-12-03 12:29:20
用525ul水溶解。计算是V=5.25×10-9/(10×10-12/10-6)=5.25×10-4(L)=525ul

是不是还要乘以2啊,他的事2OD!
7楼2012-12-03 19:53:30
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德国工兵铲

金虫 (小有名气)



today521328(金币+1): 谢谢参与
引用回帖:
7楼: Originally posted by 天空2011 at 2012-12-03 19:53:30
是不是还要乘以2啊,他的事2OD!...

不用,看摩尔数。

你之前说的很对,简单点说,就是摩尔数乘以100就到了10uM (umol/L),也就是10pmol/ul。

引物还是有可能会降解、污染,所以你先配成100uM的溶液保存,然后取一部分再稀释到10pmol/ul使用
8楼2012-12-03 21:05:58
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Fleaves

至尊木虫 (著名写手)



today521328(金币+1): 谢谢参与
525微升水就行了。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
9楼2012-12-03 22:07:07
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)


引用回帖:
3楼: Originally posted by today521328 at 2012-12-03 12:37:49
你好!
    能具体解释一下这个公式:V=5.25×10-9/(10×10-12/10-6)=5.25×10-4(L)=525ul吗?也就是各个数字都具体代表什么啊!谢谢!是不是加水的浓度是nmol数的100倍啊!比如,如果是3nmol的话就加300ul水啊 ...

体积=摩尔数/摩尔浓度。5.25ng是DNA的总摩尔数,等于5.25×10-9摩尔。10pmol/ul是你要求的摩尔浓度。等于10×10-12mol/10-6L=10-5mol/L
10楼2012-12-04 07:37:43
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)


引用回帖:
7楼: Originally posted by 天空2011 at 2012-12-03 19:53:30
是不是还要乘以2啊,他的事2OD!...

不用。OD是吸光值,是合成引物数量的一个指标。如果你需要用质量体积浓度的话,要根据分子量来计算。你是用摩尔浓度,直接用摩尔数就可以了。
11楼2012-12-04 07:49:31
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neway127

银虫 (正式写手)



today521328(金币+1): 谢谢参与
还有啊  华大引物的合成单上都有写清楚的。加多少水就稀释成了100um,保存用。然后稀释成工作浓度。
12楼2012-12-04 08:51:48
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piaoyidetian

新虫 (初入文坛)



today521328(金币+1): 谢谢参与
报告单上应该有原有浓度的,按比例稀释就可以了

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
13楼2012-12-04 12:00:30
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小鱼儿爱你啦

新虫 (小有名气)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
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引用回帖:
5楼: Originally posted by joan198108 at 2012-12-03 18:02:51
顶楼上。如果引物用量不是很大,还是建议先稀释为100的,取部分稀释为10的工作浓度,既可以避免反复冻融还可以防止污染。

如何稀释成100微摩尔的呢?

发自小木虫IOS客户端
15楼2016-04-11 22:04:07
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2012-12-05 16:19   回复  
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