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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » EB染色
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徐乐XL

金虫 (小有名气)

[求助] EB染色

为什么我跑电泳后利用EB染色条带总是不清除？有哪位能给我详细说一下注意事项？我是跑的质粒电泳，电压150V，时间40min，染色6min，是先跑电泳后染色的！
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1楼 2012-11-30 19:19:11
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orchid华仔

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我经常是用loading buffer 1ul +5ul质粒提取液  在 0.1%凝胶（20毫升含1.5ul EB）用110V电压下跑40分钟左右  条带还可以~
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做自己爱做的事
2楼2012-12-01 01:53:18
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你染胶的EB浓度用的是多少，6分钟有点少，可以多染一会。
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4楼2012-12-01 08:38:54
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weigh1111

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
不晓得你配好的EB溶液浓不浓啊~如果是红色的那种倒是应该时间染够了，如果几乎无色的话就是染的时间不够长了~
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6楼2012-12-01 13:27:05
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跳跳鱼

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 配胶时最好 2012-12-03 08:24:46
配胶的时候加一些EB进去
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快乐奋斗，创造所有。
9楼2012-12-02 08:58:51
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天空2011

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
可能染得时间断吧，另外你可以在点样的时候和loading buffer一起加EB 跑电泳
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10楼2012-12-02 10:35:28
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普通回帖

bloodwar

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
0.1%的琼脂糖也太低了吧，你不怕到时胶被溶解吗，你的靶标片度多大啊，我做6kb的片段也用0.7%的胶；另外就是你的缓冲液不好了，温度高吗，高的话要冰浴
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3楼2012-12-01 02:19:31
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动力泉

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
可能是你的EB浓度过低或者已经降解了，EB见光能容易降解
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好好学习
5楼2012-12-01 09:12:20
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徐乐XL

金虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by bloodwar at 2012-12-01 02:19:31
0.1%的琼脂糖也太低了吧，你不怕到时胶被溶解吗，你的靶标片度多大啊，我做6kb的片段也用0.7%的胶；另外就是你的缓冲液不好了，温度高吗，高的话要冰浴

谢谢
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7楼2012-12-01 21:39:41
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徐乐XL

金虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by weigh1111 at 2012-12-01 13:27:05
不晓得你配好的EB溶液浓不浓啊~如果是红色的那种倒是应该时间染够了，如果几乎无色的话就是染的时间不够长了~

胶已经发红了，就是条带不清除
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8楼2012-12-01 21:40:26
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