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airliongo

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[交流] 常用几种分子筛凝胶介绍已有5人参与

由于做实验经常碰到分离纯化选用填料的问题，整理几种分子筛凝胶及应用
做纯化的人可能经常接触到sephadex，BIO-Gel，sephacryl s-,sepharose BIo-Gel等几种填料，有时会混淆在一起，看到一个贴子较好的介绍了这些填料的区别，希望对大家有用。
sephadex(葡聚糖凝胶）：是由葡聚糖苷和3-氯-1，2环氧丙烷以醚键相互铰链而成，不同型号的葡聚糖凝胶用英文字母G表示，如G-25，G-75等，G后面的数字为凝胶吸水量再乘以10。
sephacryl：为葡聚糖偶联丙烯基，再和甲叉双丙烯酰胺聚合而成的介质。它有较高的硬度，能承受比普通凝胶更大的静水压力，由于属于部分大网孔型凝胶，可用于分离蛋白质、核酸、多糖和蛋白聚糖甚至是病毒颗粒。
sepharose琼脂糖：瑞典称sepharose；美国称Bio-gel A；英国称Segavac；丹麦称Gelarose。Sepharose主要有三种型号：2B，4B，6B，阿拉伯数字表示凝胶中干胶的百分含量。Bio-GA有6个型号：0.5M,1.5M,5M,15M,50M,150M。阿拉伯数字乘以1000000表示排阻限度。Sagavac分为：2F,4F,6F,8F,10F2℃4C6℃8C10℃阿拉伯数字表示凝胶中干胶的百分含量，F表示粉末状，C表示颗粒状。Gelarose有5种类型：2%，4%，6%，8%，10%。百分数表示干胶量。
琼脂糖凝胶属于大孔胶，由于其工作范围的下限几乎相当于葡聚糖凝胶和聚丙烯酰胺凝胶的上限，所以多用于分离400000以上的物质，比如核酸和病毒。聚丙烯酰胺凝胶：由单体丙烯酰胺合成线性多聚物，商品名为Bio-Gel P，有十种类型：从Bio-Gel P-2到P-300，p后面的阿拉伯数字乘以1000即相当于排阻限度。这种胶在极端ph下可被水解，水解后形成的羧基，具有离子交换的性质。另外，sephadex G是葡聚糖凝胶交联的，用于除盐和纯化，BIO-Gel P-是聚丙烯酰胺凝胶，它们的刚性都不是很好，尤其是得水值越大的，越是如此。而sephacryl s-,是经过接枝再交联的葡聚糖凝胶，刚性比sephadex G好很多，如果你纯化的物质分子量小些，那可以用sephadex G是，中等偏大的选择sephacryl s-,特别大的就得选择sepharose（琼脂糖凝胶），例如几十到上百KD的蛋白，或者是病毒，大分子的超螺旋DNA等，而BIo-Gel A也是琼脂糖凝胶。它们只是不同的公司而已，性能差别不大。
水合微球尺寸 (µm) 水合床体积质量干燥凝胶典型流速 (cm/hr)* 分子量分级分离范围
Bio-Gel P–2，优良 45–90 3 ml/g 5–10 100–1,800
Bio-Gel P–2，特优 <45 <10
Bio-Gel P–4，中等 90–180 4 ml/g 15–20 800–4,000
Bio-Gel P–4，优良 45–90 10–15
Bio-Gel P–4，特优 <45 <10
Bio-Gel P–6，中等 90–180 6.5 ml/g 15–20 1,000–6,000
Bio-Gel P–6，优良 45–90 10–15
Bio-Gel P–6，特优 <45 <10
Bio-Gel P–6DG 凝胶 90–180 15–20
Bio-Gel P–10 凝胶，中等 90–180 7.5 ml/g 15–20 1,500–20,000
Bio-Gel P–10 凝胶，优良 45–90 10–15
Bio-Gel P–30 凝胶，中等 90–180 9 ml/g 7–13 2,400–40,000
Bio-Gel P–30 凝胶，优良 45–90 6–11
Bio-Gel P–60 凝胶，中等 90–180 11 ml/g 4–6 3,000–60,000
Bio-Gel P–60 凝胶，优良 45–90 3–5
Bio-Gel P–100 凝胶，中等 90–180 12 ml/g 4–6 5,000–100,000
Bio-Gel P–100 凝胶，优良 45–90 3–5

个人经验有限，望后人继续补充有价值的信息。

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