应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 求助！！！DGGE胶染色后，肉眼看到很多条带，相片及凝胶成像拍不出来。怎么回事？
141/2返回列表12下一页
查看: 1909  |  回复: 13
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

晶晶7777

新虫 (小有名气)

[求助] 求助！！！DGGE胶染色后，肉眼看到很多条带，相片及凝胶成像拍不出来。怎么回事？

提的土壤总DNA，跑胶后看到还是很明显的。采用338f-gc夹，517r引物PCR后，附图为1，据说好像是没P成功。附2图为DGGE胶，159v电压，7小时后，银染20min。明明肉眼看得到很多条带，拍不出来就算了，为啥子凝胶成像也没有呢，只有隐约的一条带，ps我们实验室的成像不太好，是从两侧的灯打过来的，据说灯从下面打的图才好看。现在不知道是哪一方面问题，如果是PCR的话，升温程序如下，94℃1min,55℃40s,72℃10min.35个循环，难道是模板量太高1μL。
或者是凝胶成像的灯有问题，那怎么解决，可以换SYBR green染色会好些吗？

1.jpg



2.JPG
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2012-11-27 21:22:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

晶晶7777

新虫 (小有名气)
PCR加样量为1μL
赞一下 回复此楼
2楼2012-11-28 09:41:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

czfscf

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
为什么用拍的 不拿去扫描呢
赞一下 回复此楼
Ecological Genomics；the scientific walking hormone
3楼2012-11-28 09:59:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

CXL19880406

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
晶晶7777: 金币+5, ★★★很有帮助 2013-01-06 11:18:27
貌似没批成功呢……
赞一下 回复此楼
4楼2012-11-28 12:05:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

晶晶7777

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by czfscf at 2012-11-28 09:59:26
为什么用拍的 不拿去扫描呢

没办法，实验室没条件，不能扫描。
赞一下 回复此楼
5楼2012-11-29 10:40:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

晶晶7777

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by CXL19880406 at 2012-11-28 12:05:48
貌似没批成功呢……

当时没加marker，后来加了，P出来这样。点样1微。算是p出来了吗。右边三个是338f,517r的，左边三个是27F，1492r

BL  BAD  SY通用引物及GC夹1.jpg
赞一下 回复此楼
6楼2012-11-29 10:44:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

CXL19880406

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
6楼: Originally posted by 晶晶7777 at 2012-11-29 10:44:54
当时没加marker，后来加了，P出来这样。点样1微。算是p出来了吗。右边三个是338f,517r的，左边三个是27F，1492r

BL  BAD  SY通用引物及GC夹1.jpg
...

可以根据你设计的引物计算一下P的片段多大，以marker为标准来确定是不是你要的条带。我估计哈，左边三个应该是，右边三个貌似又废了啊，好像引物二聚体呢……
赞一下 回复此楼
7楼2012-11-29 10:53:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

晶晶7777

新虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by CXL19880406 at 2012-11-29 10:53:12
可以根据你设计的引物计算一下P的片段多大，以marker为标准来确定是不是你要的条带。我估计哈，左边三个应该是，右边三个貌似又废了啊，好像引物二聚体呢……...

是已经算了，右边三个的片段应该是200bp左右。我用的marker，后两个条带是250,100bp。这样子的话算是P好了吗
赞一下 回复此楼
8楼2012-11-29 11:16:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

晶晶7777

新虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by CXL19880406 at 2012-11-29 10:53:12
可以根据你设计的引物计算一下P的片段多大，以marker为标准来确定是不是你要的条带。我估计哈，左边三个应该是，右边三个貌似又废了啊，好像引物二聚体呢……...

忘了说了，有marker6个带，最后一个不是很清晰
赞一下 回复此楼
9楼2012-11-29 11:17:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

CXL19880406

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
9楼: Originally posted by 晶晶7777 at 2012-11-29 11:17:24
忘了说了，有marker6个带，最后一个不是很清晰...

看着不太像，条带不是很清晰，如果觉得是的话可以先往下做做看，出结果最好了。不然换一种小marker看看条带的情况
赞一下 回复此楼
10楼2012-11-29 11:27:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 晶晶7777 的主题更新
141/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 化学调剂 +5 yzysaa 2026-03-21 5/250 2026-03-21 22:12 by peike
[考研] 一志愿西安交通大学材料工程专业 282分求调剂 +10 枫桥ZL 2026-03-18 12/600 2026-03-21 22:02 by peike
[考研] 333求调剂 +5 87639 2026-03-21 7/350 2026-03-21 19:31 by ColorlessPI
[考研] 考研化学学硕调剂，一志愿985 +5 张vvvv 2026-03-15 7/350 2026-03-21 19:23 by ColorlessPI
[考研] 材料与化工（0856）304求B区调剂 +3 邱gl 2026-03-20 7/350 2026-03-21 19:05 by 15709483992
[考研] 求调剂 +5 十三加油 2026-03-21 5/250 2026-03-21 18:48 by 学员8dgXkO
[考研] 313求调剂 +4 肆叁贰壹22 2026-03-19 4/200 2026-03-21 17:33 by ColorlessPI
[考研] 299求调剂 +4 某某某某位 2026-03-21 4/200 2026-03-21 16:30 by barlinike
[考研] 279求调剂 +5 红衣隐官 2026-03-21 5/250 2026-03-21 14:59 by lature00
[考研] 化学求调剂 +4 临泽境llllll 2026-03-17 5/250 2026-03-21 02:23 by JourneyLucky
[考研] 求调剂 +3 Ma_xt 2026-03-17 3/150 2026-03-21 02:05 by JourneyLucky
[考研] 324分 085600材料化工求调剂 +4 llllkkkhh 2026-03-18 4/200 2026-03-21 01:24 by JourneyLucky
[考研] 271材料工程求调剂 +8 .6lL 2026-03-18 8/400 2026-03-21 00:58 by JourneyLucky
[考研] 296求调剂 +6 www_q 2026-03-18 10/500 2026-03-20 23:56 by JourneyLucky
[考研] 329求调剂 +9 想上学吖吖 2026-03-19 9/450 2026-03-20 22:01 by luoyongfeng
[考研] 290求调剂 +7 ^O^乜 2026-03-19 7/350 2026-03-20 21:43 by JourneyLucky
[考博] 招收博士1-2人 +3 QGZDSYS 2026-03-18 3/150 2026-03-20 11:58 by 呱呱呱呱叫
[考研] 320求调剂0856 +3 不想起名字112 2026-03-19 3/150 2026-03-19 22:53 by 学员8dgXkO
[考研] 0703化学调剂 +5 pupcoco 2026-03-17 8/400 2026-03-19 13:58 by houyaoxu
[考研] 收复试调剂生 +4 雨后秋荷 2026-03-18 4/200 2026-03-18 14:16 by elevennnne
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭