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201014162

金虫 (正式写手)


[交流] 蓝白斑筛选没问题,挑白色克隆测序无目的基因序列

最近在做克隆测序,先PCR产物纯化后连接载体PMD18-T,然后转化到JM1O9的感受态细胞,蓝白斑筛选蓝色和白色都有菌落,挑白色菌落培养后送上海生工测序,用的通用引物M13,结果上vecscreen比对,大部分不包含我的目的基因序列,相似度最大的竟然是PBR322载体,很郁闷,测了好多次了都这样,请高手指教!
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1390325032

铁虫 (初入文坛)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
想请教下在测序之前,为什么要进行蓝白斑筛选,并且挑选白色菌落测序呢?
10楼2015-05-14 09:05:31
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