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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 质粒提取
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aofeng860308

木虫 (正式写手)

[交流] 质粒提取

最近在质粒抽提的时候遇到一个头痛的问题，质粒是真核质粒，抽出来浓度1000ug/ml左右，A260/A280=1.85左右，但是跑琼脂糖凝胶电泳时，却没有条带或条带很暗。连续好几个质粒都遇到这个问题了，请问大侠们这是怎么回事啊！
另外：新抽提的原核质粒在相同浓度下，也没有以前抽提的亮度大。

[ Last edited by aofeng860308 on 2012-11-27 at 18:43 ]
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czdaeq

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1楼 2012-11-26 15:43:29
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hzlatqh

银虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
13楼: Originally posted by aofeng860308 at 2012-11-27 22:53:25
打错了，应该是1000ug/ml，但是也是普通原核质粒的10倍左右。染色的和DNase酶污染应该都没有问题，我同一批跑的其他样品都是正常的。...

那估计就是DNA浓度检测受到严重干扰了 如果DNA有1000ng/ul的话，染色肯定能看到。所以紫外法测得数值值得怀疑
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14楼2012-11-27 23:39:26
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gyesang

荣誉版主 (著名写手)
★
aofeng860308(金币+1): 谢谢参与
把所有东西全部换掉再抽
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2楼2012-11-26 19:22:54
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德国工兵铲

金虫 (小有名气)
★
aofeng860308(金币+1): 谢谢参与
提取用的试剂可能不在最佳状态了
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3楼2012-11-26 19:30:10
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aofeng860308

木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by gyesang at 2012-11-26 19:22:54
把所有东西全部换掉再抽

新的试剂盒抽出来的也一样啊
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4楼2012-11-26 19:59:39
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