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czcpudai

铜虫 (正式写手)

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[求助] 实验给药组和模型组检测蛋白和mRNA变化问题~~~

本人在细胞水平研究某一药物的抗氧化作用。分为正常组，模型组，低剂量组，中剂量组，高剂量组。初步打算如下做：
细胞长到90%的时候传代到六孔板中，50万/孔。等培养24小时后，模型组，低剂量组，中剂量组，高剂量组同时给相应的药物，再过24小时后提取每个组中细胞的RNA，做半定量RT-PCR看看目的基因表达情况。我有几个问题想各位做过类似实验的同仁们咨询一下：
1. 细胞传代后24小时给药可不可以？有点晚吗？是不是可以传代12小时后再给药？
2.每个组是不是至少做3个平行组？这样子才有统计学意义
3.像这种实验，细胞传代后，细胞中mRNA什么时候开始大量转录？
由于是第一次做这种实验，大家给点建议~~~谢谢！

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