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实验给药组和模型组检测蛋白和mRNA变化问题~~~
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本人在细胞水平研究某一药物的抗氧化作用。分为正常组,模型组,低剂量组,中剂量组,高剂量组。 初步打算如下做: 细胞长到90%的时候传代到六孔板中,50万/孔。等培养24小时后,模型组,低剂量组,中剂量组,高剂量组同时给相应的药物,再过24小时后提取每个组中细胞的RNA,做半定量RT-PCR看看目的基因表达情况。我有几个问题想各位做过类似实验的同仁们咨询一下: 1. 细胞传代后24小时给药可不可以?有点晚吗?是不是可以传代12小时后再给药? 2.每个组是不是至少做3个平行组?这样子才有统计学意义 3.像这种实验,细胞传代后,细胞中mRNA什么时候开始大量转录? 由于是第一次做这种实验,大家给点建议~~~谢谢! |
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2楼2012-11-23 14:58:56









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