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shizishanshang

至尊木虫 (职业作家)

[求助] pCAMBIA2301问题

各位好,我前面用pCAMBIA2301做表达载体,用NCOI和BSTEII双酶切后,回收大片段,通过clontech的infusion方法将大片段和我的基因连起来。基因全长是按照infusion的方法设计引物扩增的。

现在有个问题,NCOI和BSTEII酶切位点分别在9763和2062,这样的话双酶切后回收大片段与ORF相连,这样我看35S promoter好像都被我切掉了啊?岂不是我得到的东西怎么也不可能表达了?

请大家多发表意见,着急啊,身边也没有可以咨询的人,所以来求助大家了。谢谢了!

另外问一下 ,35S启动子序列哪里可以查得到呢?
我的NCOI只有一个酶切位点啊,惨了啊[ Last edited by shizishanshang on 2012-11-21 at 23:06 ]
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  • 2012-11-21 23:04:56, 71.5 K

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15879003030

铜虫 (小有名气)

自己加一个外源启动子上去啊
2楼2013-08-13 11:47:51
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赫玉影

新虫 (初入文坛)

大家好,我想知道一下35s启动子的详细信息,比如序列图与酶切位点的位置以及种类,非常感谢
3楼2014-01-18 20:02:35
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