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紫外法测定CAT活性
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| 最近要测定CAT活性，看到很多人是采用在240nm下进行测定。具体如果确定究竟用多长时间的呢？看网上说要数据要用直线的那一段，可是我做出来的数据完全没有规律。另外就是发现在测定的过程中，会产生很多的气泡，是摇匀的过程中产生的呢，还是因为发生了双氧水分解产生的水和氧气呢？气泡会对测定的OD值产生影响吗？期盼做过实验的高手指导指导。 |
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【答案】应助回帖
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stmoon: 金币+2, ★有帮助 2012-11-27 11:08:27
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| “H2O2在240nm波长下有强烈吸收，过氧化氢酶能分解过氧化氢，使反应溶液吸光度(A240)随反应时间而降低。根据测量吸光率的变化速度即可测出过氧化氢酶的活性。”我没有做过只是本科时毕业设计一个宿舍的同学做的，就帮着其做的。记得是在黑暗状态下，就是屋子窗帘都拉上，然后在比色皿中添加光氧化氢迅速盖上暗盒开始计时测定，计时读数。气泡有影响但是尽量减少，是双氧水分解产生的。同学做的数据还是很有规律的。 |
2楼2012-11-21 11:21:01