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小子木雨

铜虫 (小有名气)

[求助] AFM测蛋白质

刚用AFM测试了蛋白质的表面结构,但是不知道这个图是不是肌原纤维蛋白的表面结构,这些细小的微丝应该不是肌节吧?那些亮的小点又是什么呢?向懂的大侠们请教下,非常感谢
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  • 2012-11-19 19:06:49, 281.74 K

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Jackcd12

至尊木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你这图扫描质量太差了。从图上看,颗粒状的蛋白质单体(或多聚体)还没有完全自组装成fibres,更谈不上节点。明亮的地方要么是杂质,要么是多聚体而已。
Themoreamanlearns,themoreheknowshisignorance!
2楼2012-11-19 19:57:40
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小子木雨

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by Jackcd12 at 2012-11-19 19:57:40
你这图扫描质量太差了。从图上看,颗粒状的蛋白质单体(或多聚体)还没有完全自组装成fibres,更谈不上节点。明亮的地方要么是杂质,要么是多聚体而已。

噢 谢谢大侠的指点 那我要怎么改善呢 是提纯样品呢还是仪器问题呢?刚接触这块儿不是很了解 希望大侠多多指导  谢谢!
3楼2012-11-19 21:12:30
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Jackcd12

至尊木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
小子木雨: 金币+5, ★★★很有帮助, 谢谢 2012-11-20 14:08:52
取决于你的目的,你从sigma公司买的样品的话,不必提纯。重点在组装条件的摸索;其次,AFM粗扫描时,范围大一点(5-10um)看到比较好的区域后,再高分辨慢扫描,为了反映蛋白质fiber的特征,可以把扫描范围缩小到2um左右,这样很多细节就可以看清楚了。
Themoreamanlearns,themoreheknowshisignorance!
4楼2012-11-19 21:29:23
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小子木雨

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by Jackcd12 at 2012-11-19 21:29:23
取决于你的目的,你从sigma公司买的样品的话,不必提纯。重点在组装条件的摸索;其次,AFM粗扫描时,范围大一点(5-10um)看到比较好的区域后,再高分辨慢扫描,为了反映蛋白质fiber的特征,可以把扫描范围缩小到2um左 ...

谢谢!不过还不是很明白,什么叫自组装,我把蛋白溶液稀释后滴在云母片上自然干燥后测试的,这期间发生的自组装吗?
5楼2012-11-20 14:12:45
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Jackcd12

至尊木虫 (知名作家)

很多蛋白质常以单体和多聚体形成分散在溶液中,在一定条件下,这些多聚体进一步组织成更大的结构,比如,线性结构,分叉结构等,你看到的不一定是蛋白质本身原来的存在形式。
Themoreamanlearns,themoreheknowshisignorance!
6楼2012-11-20 15:57:57
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小子木雨

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by Jackcd12 at 2012-11-20 15:57:57
很多蛋白质常以单体和多聚体形成分散在溶液中,在一定条件下,这些多聚体进一步组织成更大的结构,比如,线性结构,分叉结构等,你看到的不一定是蛋白质本身原来的存在形式。

噢 明白了 谢谢
7楼2012-11-20 16:04:36
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suman0313

铜虫 (小有名气)

单仪器测试来说,缩小扫描范围,增加sampleline到512以上,减小扫描速率到1一下,图形会相对好看,建议看下phase相图,效果可能会更好,制样最好在洁净条件下,要不会污染样品和探针,效果就差好多了。
8楼2012-11-20 17:29:21
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小子木雨

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
8楼: Originally posted by suman0313 at 2012-11-20 17:29:21
单仪器测试来说,缩小扫描范围,增加sampleline到512以上,减小扫描速率到1一下,图形会相对好看,建议看下phase相图,效果可能会更好,制样最好在洁净条件下,要不会污染样品和探针,效果就差好多了。

谢谢您的指导!
9楼2012-11-22 13:43:54
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