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江户川哀

新虫 (小有名气)

[求助] 求EDC连蛋白的详细方法步骤

用EDC连蛋白折腾一个多月了,还是没搞定。求大神赐予我EDC连蛋白的详细方法步骤。
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wangmingyue

木虫 (小有名气)

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江户川哀: 金币+3 2012-11-21 23:50:04
楼主应该说的是酰胺化反应吧,需要用EDC/NHS活化羧基,加几滴三乙胺,需要指出的是这个反应必须在无水条件下进行,所以选择反应溶剂很重要。我只做过普通的酰胺化反应,用EDC/NHS在DMSO中,很好反应。没有做过蛋白的
3楼2012-11-19 16:20:29
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yongbo_liang

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

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江户川哀: 金币+3 2012-11-21 23:49:58
一般在室温下做24h,pH5-7,EDC可以过量点,反应还是比较容易的。EDC先活化羧基形成EDC/羧基活泼中间酯,由于这个酯在水中很容易水解(一般20-30min就有开始水解了,导致羧基重新回到未活化状态)
2楼2012-11-19 11:01:24
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