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yuguiyan

至尊木虫 (文坛精英)

[求助] PCR是否要扩增出所有碱基?不多不少,也不突变?

PCR出基因后欲稳定转染进入细胞,是否要扩增出所有碱基?不多不少,也不突变?
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gyesang

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1949stone: 金币+1, 鼓励 2012-11-17 10:02:12
是的,这个在构建载体之前设计好,用高保真酶扩增,不会出现多,少或者突变这种情况,一定要是一样的序列,考虑SNP,才能开始做实验,否则实验结果你没有办法解释,除非你就像看突变效应
学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
2楼2012-11-16 22:56:38
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zhlf1989513

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

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1949stone: 金币+2, 鼓励 2012-11-17 10:02:25
yuguiyan: 金币+1 2012-11-28 19:56:49
我觉得看你后续做什么实验,如果是让这段基因表达蛋白的话,那你就不能改变它的阅读框;如果仅仅是P出来构建载体然后转染,考察其对其他基因的影响的话可以突变一些没问题,只要到时候Blast的时候是你要的基因就行。。。。。。
keepon
3楼2012-11-17 08:57:39
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