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lioboo

铁虫 (正式写手)

[求助] 怎样找出大肠杆菌在高温下生长所必须的那个（些）基因

已知某个基因是大肠杆菌在40度以上环境生长所必需的，如果缺失则不能在40度环境下生长，用什么方法才能找到这个基因呢？
我的想法是先用紫外诱变，然后筛选出在常温下能生长，而在40度不能生长的菌落，然后分析这个突变体的蛋白表达谱，与原菌株对比，不知这种方法是否可行？
求高手给出更好的方法

[ Last edited by lioboo on 2012-11-16 at 21:14 ]
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死生挈阔与子同悦，执子之手与子偕老
1楼 2012-11-16 21:11:28
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大海一孤舟

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
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lioboo: 金币+3, ★★★很有帮助, 很有道理，非常感谢 2012-11-17 16:11:44
lioboo: 金币+2, 没人回答就都给你吧 2012-11-20 22:03:53
你这个办法貌似不行，突变菌一般是高温蛋白失活导致的，蛋白质的表达应该没什么大的变化。当然也不排除是由于突变后蛋白表达减少导致的效果。不过我建议你直接做一个正常温度培养的菌与高温条件下培养的菌的蛋白质双向电泳，找到表达差异较大的蛋白，估计就与高温生长相关了，没有必要做突变吧。我是这么想的，仅供参考。
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2楼2012-11-17 12:04:47
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