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fddyn

金虫 (小有名气)

[求助] 新手求通过marker估计下dna浓度

用传统方法手提的土壤微生物dna,杂质含量太高测浓度的ND-1000分光光度计测出来不准,故想通过跑胶与marker比较估计个大概浓度,也好知道纯化的回收率,谢谢
Q1--Q5 均为qiagen胶回收试剂盒纯化后的样品,marker(M)在中间,1--8为粗提产物
样品上样量为 :5ul
marker上样量为:5ul
marker用的是 Lambda DNA/Hind III Marker,上样6ul时 23130bp (最后那条)是238.4ng,9416bp(倒数第二条)是97.1ng

2012.11.09---.JPG
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fddyn

金虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by 大海一孤舟 at 2012-11-17 11:42:01
照胶的程序里面有浓度比较的软件,可以自己学习一下。

你好,请问你说的是ImageJ软件吗?才开始用,不太会,就想以版上虫友估的为基础判断软件用的对否
10楼2012-11-17 23:46:33
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fddyn

金虫 (小有名气)

再补充点,跑的是0.5%的琼脂糖胶
为什么纯化后比纯化前看上去片段大呐
2楼2012-11-16 19:24:10
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
fddyn: 金币+3, 有帮助 2012-11-17 23:47:00
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-11-19 13:59:23
marker9kb与23kb的带跑得不是很开,而且浓度明显比样品高。可以考虑少上点marker,电泳时间长一点再看。从目前的粗略估计,大概浓度在大约6ng/ul。
纯化前的样品杂质多,浓度较高,条带笑脸,电泳的表观分子量稍微偏小是很正常的。
3楼2012-11-17 08:00:16
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elbo

金虫 (小有名气)

貌似片段小于23kb,请问胶上面的标记是怎么弄的,谢谢。
4楼2012-11-17 08:04:35
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