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cj22xmc

新虫 (正式写手)

[求助] HPLC不出峰

HPLC不出峰。样品在205nm有最大吸收,进样后不出峰,流动相用甲醇和水不同比例试过,乙腈和水不同比例也试过;柱子为新柱子,不接柱子也不出峰;氘灯为新的;测其他物质有峰(改变了波长),已经进了多针,都未见出峰,也未见压力上升,是啥原因?望高手指导!
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mc
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喵喵与咩咩

铁杆木虫 (著名写手)

要把生活过成诗和远方

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
不出峰的原因有很多种:1.如果你是中药材的话有可能提取方法不对,样品溶液浓度很小,达不到检测限
                       2.你的药物比较特殊,单纯的水和有机相不出峰,这时候你可以考虑加入少量缓冲盐,考虑到你的检测波长很低,建议加入0.05%的磷酸(注意测试一下PH,不要超过柱子的承受范围);如果再不行就加缓冲盐
                     
另外的话,建议你多查一下文献,多思考原因。药物的性质如何,现在有哪些文献
生命不息,奋斗不止
10楼2012-11-19 12:40:00
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mxx7456

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
基线正常吗,加大浓度试试看呢
2楼2012-11-16 17:56:23
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longsmile

木虫 (正式写手)

加浓度看看  换样品的批次
3楼2012-11-16 19:46:38
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wangfei.ac

铁杆木虫 (正式写手)


【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
如果是碱性物质倒有可能,峰会很宽,难以察觉,要比正常的样品进样浓度加大数倍方可出峰,在分析天然产物生物碱类成分时这种情况时有出现。
4楼2012-11-16 20:16:09
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