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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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chjinzhi

银虫 (正式写手)
引用回帖:
9楼: Originally posted by cicelyzh at 2012-11-17 11:49:22
你确定不是仪器的问题吗？是否电转化其它感受态受体电压能上去吗？
还有，你知道5mg质粒有多少拷贝吗？一般做点高效率的感受态是大于10的八次方cfu/ug质粒DNA，质粒的用量是10pg-0.1ng。效率较差的受体（低于10的 ...

师姐也用了那台仪器，她的电压就上到了2.2KV。我做的是BT的感受态，BT的电转效率不高。而且我电转时的感受态浓度比较高。基本上50ml的菌液全部做成200ul的感受态。所以我才选择那么高浓度的质粒。
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11楼2012-11-18 09:58:13
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
11楼: Originally posted by chjinzhi at 2012-11-18 09:58:13
师姐也用了那台仪器，她的电压就上到了2.2KV。我做的是BT的感受态，BT的电转效率不高。而且我电转时的感受态浓度比较高。基本上50ml的菌液全部做成200ul的感受态。所以我才选择那么高浓度的质粒。...

明白了。既然别的感受态电压能上去，肯定不是仪器问题了。问题可能还是出在你做的感受态上面。50ml菌液做成200ul感受态，细胞浓度是不是太大了？BT转化效率真的有那么低吗？你可以计算一下到底需要多少细胞。
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12楼2012-11-18 15:27:13
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chjinzhi

银虫 (正式写手)
引用回帖:
12楼: Originally posted by cicelyzh at 2012-11-18 15:27:13
明白了。既然别的感受态电压能上去，肯定不是仪器问题了。问题可能还是出在你做的感受态上面。50ml菌液做成200ul感受态，细胞浓度是不是太大了？BT转化效率真的有那么低吗？你可以计算一下到底需要多少细胞。...

好的。谢谢！
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13楼2012-11-18 19:21:04
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chjinzhi

银虫 (正式写手)
送鲜花一朵
引用回帖:
8楼: Originally posted by 大海一孤舟 at 2012-11-17 11:46:47
直接用纯水试试吧，看看是不是仪器有什么毛病，不要只考虑实验，也要考虑实验仪器

换了博乐的电击仪，昨晚电转成功了！谢谢！
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14楼2012-11-19 18:57:56
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xissy

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
14楼: Originally posted by chjinzhi at 2012-11-19 18:57:56
换了博乐的电击仪，昨晚电转成功了！谢谢！...

请问，你的其他参数不变吗？例如感受态的浓度和质粒的浓度，仅仅换成伯乐的电击仪，就成功了吗？
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15楼2015-01-22 10:53:52
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