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huangq816

金虫 (正式写手)

[求助] HPLC 空白干扰的问题

我最近在做一个产品的方法开发,发现用NH4H2PO4-乙腈做流动相,空白总是有很多鬼峰出现。色谱条件如下:

色谱柱:Zorbax Eclipse Plus C8 4.6mm×150mm, 5μm或等同色谱柱。

流动相:

-       流动相A:称取磷酸二氢铵2.3g,加水1000mL使溶解;

-       流动相B:乙腈。
时间(min)     流动相B(%)
             0:            8
        0-18:        8-20
        18-30:        20-55
        30-35:         55
平衡时间:5min。
流速:1.5mL/min。
柱温:40°C。
检测波长:250nm。
进样量:10μL。
其实,这个色谱条件已经达到预期的目标了,可以让主峰和各个杂质达到完全分离,可是在22-35分钟之间总有一些鬼峰出现,它们可能会干扰杂质峰的定量测定。我想问问这是什么问题?有什么解决的方法么?
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人生就像一场马拉松,跑的最快的未必是笑到最后的!
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huangq816

金虫 (正式写手)

后来发现是试剂的原因,放缓梯度,同时更换色谱柱,降低乙腈的比例后,问题得到很好地解决
人生就像一场马拉松,跑的最快的未必是笑到最后的!
16楼2012-11-26 13:38:46
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marktiger

至尊木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
huangq816: 金币+1, 有帮助, 谢谢!有可能吧 2012-11-13 16:08:02
是不是你试剂的问题,换个厂家的试剂试试。
marktigerchen
2楼2012-11-13 16:03:26
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my1367621657

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
从头开始: 金币+1, 感谢参与 2012-11-14 15:35:20
走一针空白溶剂看看,还是有的话你的流动相可能有问题
love is power
3楼2012-11-14 14:53:51
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chunxiaxhg

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
从头开始: 金币+1, 感谢参与 2012-11-14 15:35:26
流动相有问题的可能性不大,从出鬼峰的时间上看,应该是你的梯度本身引起的峰
4楼2012-11-14 15:33:25
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