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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 色谱柱长短和待测成分的保留时间
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douya_

金虫 (小有名气)

[求助] 色谱柱长短和待测成分的保留时间

如题：现遇到一个问题啊，色谱柱是同型号，内径和填料粒度均相同，但以前分析样品用的是12.5cm的柱子，现在只有25cm的柱子，以前短柱分析成分时的梯度是
0        10％B(有机相)
25        10％B
28         30％B
53          30％B
63           46％B
69        58％B
73        85％B
83        85％B
现在要换成25cm的长柱，梯度怎么设定？有人说柱子变长了，分析时间变长，但时间和梯度怎么变啊，望说明原因！金币不多，望多帮忙
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1楼 2012-11-13 14:19:32
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回帖置顶 ( 共有1个 )

fx344600

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
听不到: 金币+2, 感谢您的解答，欢迎常来分析版 2012-11-15 10:49:07
douya_: 金币+1 2012-11-15 16:38:32
douya_: 回帖置顶 2012-11-15 16:39:33
梯度要靠自己去摸索，不是有什么公式可以套用解决问题的。
你用液相色谱最优先考虑的是怎么把的各个物质分开，而不是一来就想怎么缩短你的保留时间。
先用原来的梯度跑一次（理论上肯定比原来分离效果更好），然后你在根据各个梯度里面的分离度在看是否可以压缩时间。一定要了解原来方法各个梯度段是用来分开哪几个峰的，别最后时间优化了，想看到的东西也看不到了。

个人觉得这个梯度太复杂了，挂柱就用了25分钟你可以优化这个先，柱子变长了，所以53    30％B   63     46％B这个应该也可以优化，最后几个梯度变化应该是看是不是有极性更弱的峰，了解清楚开发这个方面人的目的再动后面的。
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16楼2012-11-15 09:49:14
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

guevara1967

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
douya_: 金币+1, ★有帮助 2012-11-13 15:08:38
crity328: 金币+1, 专家辛苦了，欢迎常来~ 2012-11-13 19:25:13
最简单的办法，你先按现有梯度走一针，再把各时间段扩大两倍走一针，两针比较一下，就可以看看该怎么调整了
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梦想、激情、灵感、体验--che
2楼2012-11-13 14:25:41
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普通回帖

douya_

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by guevara1967 at 2012-11-13 14:25:41
最简单的办法，你先按现有梯度走一针，再把各时间段扩大两倍走一针，两针比较一下，就可以看看该怎么调整了

再把各时间段扩大两倍走一针，那岂不是要166分钟，太长了，有没有更好的方法啊
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3楼2012-11-13 15:08:26
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yuwenhao

禁虫 (正式写手)
★ ★
感谢参与，应助指数 +1
douya_: 金币+1 2012-11-13 16:10:36
crity328: 金币+1, 感谢交流，欢迎常来！ 2012-11-13 19:25:30
本帖内容被屏蔽
4楼2012-11-13 15:24:23
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douya_

金虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by yuwenhao at 2012-11-13 15:24:23
保留时间一定会延长的，你可以先走一针看看，以实际情况来调整你的梯度

还想问一下，知道柱长和保留时间的转化公式吗？他们有人说有个转化公式的，但我没找到
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5楼2012-11-13 16:10:30
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yuwenhao

禁虫 (正式写手)
本帖内容被屏蔽
6楼2012-11-13 16:29:17
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wy1518

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
crity328: 金币+2, 感谢交流，欢迎常来！ 2012-11-13 19:25:51
各项参数和梯度先不要调整，用长柱进一针，83后以最后一个梯度走完检测，看看情况如何。
内径粒度一样的话，在83左右分离就走完了，后面就相当于冲洗柱子了。
不过柱子换了效果肯定会有变化，这要根据在长柱走的效果来继续改进。
柱子长了，最后检测出来的应该是各峰分离度增大。
再优化条件时可以增大流速，微调有机相的比例以缩短分离时间。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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7楼2012-11-13 18:32:22
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zxwcn

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
这个木有计算公式啊，楼主可以安原来的方法进一针，然后做调整
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8楼2012-11-13 18:42:02
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zwj_1985

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
douya_: 金币+1, ★有帮助 2012-11-13 21:19:07
先不要着急换梯度，可以按原来的梯度进一针，一般保留时间肯定会变长，可以将流速提高些
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9楼2012-11-13 19:31:28
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douya_

金虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by zwj_1985 at 2012-11-13 19:31:28
先不要着急换梯度，可以按原来的梯度进一针，一般保留时间肯定会变长，可以将流速提高些

流速已经是1ml/min，再提高不好了吧，柱压太高
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10楼2012-11-13 21:20:25
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