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douya_

金虫 (小有名气)

应助: 0 (幼儿园)
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虫号: 1956397
注册: 2012-08-26
专业: 中药学其他科学问题

[求助] 色谱柱长短和待测成分的保留时间

如题：现遇到一个问题啊，色谱柱是同型号，内径和填料粒度均相同，但以前分析样品用的是12.5cm的柱子，现在只有25cm的柱子，以前短柱分析成分时的梯度是
0       10％B(有机相)
25       10％B
28       30％B
53       30％B
63          46％B
69       58％B
73       85％B
83       85％B
现在要换成25cm的长柱，梯度怎么设定？有人说柱子变长了，分析时间变长，但时间和梯度怎么变啊，望说明原因！金币不多，望多帮忙

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1楼 2012-11-13 14:19:32

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fx344600

铁虫 (初入文坛)

应助: 4 (幼儿园)
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在线: 3.3小时
虫号: 737908
注册: 2009-04-01
专业: 质谱分析

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
听不到: 金币+2, 感谢您的解答，欢迎常来分析版 2012-11-15 10:49:07
douya_: 金币+1 2012-11-15 16:38:32
douya_: 回帖置顶 2012-11-15 16:39:33

梯度要靠自己去摸索，不是有什么公式可以套用解决问题的。
你用液相色谱最优先考虑的是怎么把的各个物质分开，而不是一来就想怎么缩短你的保留时间。
先用原来的梯度跑一次（理论上肯定比原来分离效果更好），然后你在根据各个梯度里面的分离度在看是否可以压缩时间。一定要了解原来方法各个梯度段是用来分开哪几个峰的，别最后时间优化了，想看到的东西也看不到了。

个人觉得这个梯度太复杂了，挂柱就用了25分钟你可以优化这个先，柱子变长了，所以53 30％B 63 46％B这个应该也可以优化，最后几个梯度变化应该是看是不是有极性更弱的峰，了解清楚开发这个方面人的目的再动后面的。