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lioboo

铁虫 (正式写手)

zhaoqirui: 回帖置顶 2012-11-14 09:31:03
引用回帖:
7楼: Originally posted by zhaoqirui at 2012-11-13 09:35:12
平板放4度我不懂?做甘油管我不会啊?大哥 求详解?...

你可以去网上搜搜平板划线法分离单菌落的方法,任何一本微生物教材也都会有,长好的平皿可以放在4度冰箱里做短时间的保存,长时间存放就要作甘油管了,网上也有很多制作方法,照着做就行了。
死生挈阔与子同悦,执子之手与子偕老
11楼2012-11-13 18:33:46
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lioboo

铁虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
zhaoqirui: 金币+2, ★★★很有帮助 2012-11-14 09:30:49
引用回帖:
11楼: Originally posted by lioboo at 2012-11-13 18:33:46
你可以去网上搜搜平板划线法分离单菌落的方法,任何一本微生物教材也都会有,长好的平皿可以放在4度冰箱里做短时间的保存,长时间存放就要作甘油管了,网上也有很多制作方法,照着做就行了。...

平板划线法 http://baike.baidu.com/view/1452295.htm
酵母可用YPD培养基培养
YPD培养基:10g/L 酵母提取物(yeast extract),20g/L  Peptone,20 g/L甘油。
向里面加琼脂就是固体培养基
甘油冷冻保藏法
本方法适合于中、长期菌种保藏,保藏时间一般为2-4年左右。
(1)用火焰灭菌的接种环取斜面菌种在平皿上划线分离单菌落。
(2)平皿倒置于30℃或37℃恒温培养箱,培养24-48小时,至单菌落的大小为3mm左右。
(3)挑取一个单菌落,接种于一个装50mL的300mL三角瓶中30℃或37℃振荡培养10-15小时,至菌密度OD600为1.0-1.5。
(4)用火焰灭菌的接种环取少量种子液,涂片后,作革兰氏染色,在显微镜下观察菌体的形态,及是否有杂菌。
(5)按30%甘油:种子液为1:1(V/V)的量加入无菌甘油, 混合后分装至事先灭菌的菌种保存管(1-2mL/管),-80℃或液氮保存。
死生挈阔与子同悦,执子之手与子偕老
12楼2012-11-13 18:44:08
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