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zhaoqirui铁虫 (著名写手)
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[求助]
酵母分离纯化
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| 小弟从土壤中筛出来，和网上的酵母菌菌落图相比可知为酵母菌。接下来不知该如何分离纯化，如何保藏和作种子液啊！求高手指点！ |
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【答案】应助回帖
★ ★
zhaoqirui: 金币+2, ★★★很有帮助 2012-11-14 09:30:49
zhaoqirui: 金币+2, ★★★很有帮助 2012-11-14 09:30:49
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平板划线法 http://baike.baidu.com/view/1452295.htm 酵母可用YPD培养基培养 YPD培养基：10g/L 酵母提取物（yeast extract），20g/L Peptone，20 g/L甘油。 向里面加琼脂就是固体培养基 甘油冷冻保藏法 本方法适合于中、长期菌种保藏，保藏时间一般为2-4年左右。 （1）用火焰灭菌的接种环取斜面菌种在平皿上划线分离单菌落。 （2）平皿倒置于30℃或37℃恒温培养箱，培养24-48小时，至单菌落的大小为3mm左右。 （3）挑取一个单菌落，接种于一个装50mL的300mL三角瓶中30℃或37℃振荡培养10-15小时，至菌密度OD600为1.0-1.5。 （4）用火焰灭菌的接种环取少量种子液，涂片后，作革兰氏染色，在显微镜下观察菌体的形态，及是否有杂菌。 （5）按30%甘油：种子液为1：1（V/V）的量加入无菌甘油， 混合后分装至事先灭菌的菌种保存管（1-2mL/管），-80℃或液氮保存。 |
12楼2012-11-13 18:44:08
2楼2012-11-12 22:14:04
3楼2012-11-13 00:40:47
wzq_ing
金虫 (正式写手)
- 应助: 204 (大学生)
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- 注册: 2011-12-13
- 专业: 微生物学
4楼2012-11-13 08:37:34