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qingchayu

新虫 (小有名气)

[求助] 请帮忙看一下这张PCR的溶解曲线图

请各位老师帮忙看一下这个real-time PCR的结果,请问要怎么分析它呢?我PCR扩增的是一个目的基因和GAPDH内参基因,那这两个峰是不是分别就代表这两个基因呢?可以看出哪个是目的基因哪个是内参基因么?十分感谢!

Figure2.jpg
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2008liulin

铁虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
qingchayu: 金币+5, ★★★★★最佳答案, 十分感谢! 2012-11-12 20:42:21
前面一个是内参,后面一个峰是目的基因。看溶解曲线的飞起来的时间前后可以判断。另外,曲线对称较好,说明引物特异性好,可以使用。
2楼2012-11-12 00:09:42
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qingchayu

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 2008liulin at 2012-11-12 00:09:42
前面一个是内参,后面一个峰是目的基因。看溶解曲线的飞起来的时间前后可以判断。另外,曲线对称较好,说明引物特异性好,可以使用。

十分感谢老师的回答,我还想再问一下峰值在溶解曲线中一般是什么时候出现呢?是不是GAPDH的固定出峰温度就是86度左右呢?您说的曲线的对称性和引物的特异性有什么关系呢?
3楼2012-11-12 20:46:17
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