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新虫 (小有名气)

[求助] 请帮忙看一下这张PCR的溶解曲线图

请各位老师帮忙看一下这个real-time PCR的结果，请问要怎么分析它呢？我PCR扩增的是一个目的基因和GAPDH内参基因，那这两个峰是不是分别就代表这两个基因呢？可以看出哪个是目的基因哪个是内参基因么？十分感谢！

Figure2.jpg

1楼 2012-11-11 22:57:20

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铁虫 (著名写手)

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
qingchayu: 金币+5, ★★★★★最佳答案, 十分感谢！ 2012-11-12 20:42:21

前面一个是内参，后面一个峰是目的基因。看溶解曲线的飞起来的时间前后可以判断。另外，曲线对称较好，说明引物特异性好，可以使用。

2楼2012-11-12 00:09:42

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新虫 (小有名气)

引用回帖:

2楼: Originally posted by 2008liulin at 2012-11-12 00:09:42
前面一个是内参，后面一个峰是目的基因。看溶解曲线的飞起来的时间前后可以判断。另外，曲线对称较好，说明引物特异性好，可以使用。

十分感谢老师的回答，我还想再问一下峰值在溶解曲线中一般是什么时候出现呢？是不是GAPDH的固定出峰温度就是86度左右呢？您说的曲线的对称性和引物的特异性有什么关系呢？

3楼2012-11-12 20:46:17

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