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cfaaa4460新虫 (初入文坛)
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石蜡C18H38 是否进入到了木材细胞壁中
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大家好！我这里有用石蜡处理过的木材，需要确定石蜡是否进入到了木材的细胞壁中。请推荐方法。木材细胞壁的微孔尺寸在几个纳米级。我一外行，折腾着尝试了很久了，请大家不吝赐教！ 染色是目前在尝试的方法。 木材为极性材料，石蜡为非极性材料。有人推荐用两种荧光剂染色，一种极性荧光剂，一种非极性荧光剂。请教那些是极性荧光剂，哪些是非极性荧光剂。哪些算极性染料，哪些算非极性染料？我一下子用两种染料上去，对木材和石蜡分别染色，然后浸注石蜡入木材，这样可以吗？ 试用了几种染料，都不合适。请推荐可以确定石蜡是否进入到了木材的细胞壁中的方法，染色的染料和方法，万分感谢！ 同时在找自身带颜色的石蜡，就是石蜡身上挂上个什么基团能够显示颜色的物质，不知道有没有这种已经合成好的物质可以用。 恳请大家帮忙！万分感谢！解决问题金币赠送。 [ Last edited by cfaaa4460 on 2012-11-9 at 07:17 ] |
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nanzhanshi2
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3楼2012-11-23 11:00:45
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【答案】应助回帖
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zhoupeng87: 金币+5, 应助指数+1, 欢迎交流 2013-07-15 07:51:35
zhoupeng87: FC-EPI+1 2013-07-15 07:51:44
zhoupeng87: 金币+5, 应助指数+1, 欢迎交流 2013-07-15 07:51:35
zhoupeng87: FC-EPI+1 2013-07-15 07:51:44
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Q1. 需要确定石蜡是否进入到了木材的细胞壁中. A1. 听起来象是做显微镜石蜡切片标本. 建议参考一下植物显微镜切片标本制做的书籍. 这才是关键中的关键, 因为您提出的问题这些写书的老前辈全都遇过. 木材为极性材料，石蜡为非极性材料。有人推荐用两种荧光剂染色，一种极性荧光剂，一种非极性荧光剂。 Q2. 请教那些是极性荧光剂，哪些是非极性荧光剂。哪些算极性染料，哪些算非极性染料？ A2. 这样说好了, 杯子里装了无色透明的水与煤油, 加一点荧光染料下去搅拌. 会让杯底水层呈现荧光的就是极性荧光染料象是荧光黄(Fluorescein)黄绿色荧光, 罗丹明(Rhodamine)粉红~黄色荧光, 会让杯面油层呈现荧光的就是非极性荧光染料象是蒽（anthracene）蓝荧光, 香豆素(Coumarin)蓝荧光, 芘（pyrene) Q3. 我一下子用两种染料上去，对木材和石蜡分别染色，然后浸注石蜡入木材，这样可以吗？ A3. 染色是为了判断切片组织断面的极性分布. 所以最好是在石蜡化完成之后, 把木材样本切片短暂的浸泡在中等极性染浴 (e.g. 70% 丙酮:芘（pyrene), 30%水:荧光黄(Fluorescein))三十秒, 然后用70%酒精漂洗 3~5秒*3次把多余染剂洗去, 然后拿到荧光显微镜底下照相判读影像. 预期的结果是木材细胞壁呈红黄色, 石蜡呈蓝色. 没有荧光显微镜的话就用普通光学显微镜吧, 预期的结果是木材细胞壁呈粉红色, 石蜡呈无色. P.S.1如果没有荧光显微镜, 那么也不一定非要使用非极性荧光染料, 很多分散染料都是非极性的, 不妨考虑看看. P.S.2 生物有个体差异, 所以生物实验的不确定性颇大. 这代表每次实验需要正面对照组(positive control) -- 细胞壁经过苯甲酰氯酯化变成非极性表面, 负面对照组(negative control)细胞壁经过漂白水氧化变成极性表面, 未处理组(un-treated), 处理组(treated) 这可能是个有趣的计划, 祝您好运. |
4楼2013-07-15 07:47:21