应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 基因串联表达
51/1返回列表
查看: 2008  |  回复: 14
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

761429495

新虫 (小有名气)

[交流] 基因串联表达

同志们：
我想把两个基因串联起来表达，克隆的时候这两个基因的引物该如何设计呢，或者还有什么方法可以把这两个基因串联起来，有知道的童鞋指导指导啊
回复此楼

» 猜你喜欢

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2012-11-06 09:43:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zgb1982

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我觉得直接连接基因不是串联表达吧，只是融合蛋白。应该两个基因分别由自己的启动子再连接起来
赞一下 回复此楼
6楼2012-11-06 13:04:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 15 个回答

zhlf1989513

金虫 (小有名气)
★ ★ ★
761429495(金币+1): 谢谢参与
小丹木木: 金币+2, 鼓励应助 2012-11-06 17:24:34
1、在第一个基因末端和第二个基因的前端加入相同的酶切位点，克隆后酶切再连接。
2、可以设计两对引物。第一段基因的下游引物多出大概多出20个碱基左右，第二段基因的上游引物也多出大概20个碱基左右，这两个“20个碱基”互补。当然这样的话最终连接后会多出来20个碱基对。
赞一下(1人) 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

761429495
2楼2012-11-06 10:12:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

blackrose8089

铁杆木虫 (职业作家)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
可以设计酶切位点连接，但应该注意到ORF 不要移码，也可以融合PCR融合到一块
赞一下 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

761429495
3楼2012-11-06 10:21:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

761429495

新虫 (小有名气)
送鲜花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by zhlf1989513 at 2012-11-06 10:12:16
1、在第一个基因末端和第二个基因的前端加入相同的酶切位点，克隆后酶切再连接。
2、可以设计两对引物。第一段基因的下游引物多出大概多出20个碱基左右，第二段基因的上游引物也多出大概20个碱基左右，这两个“20个 ...

那引物设计时第二个基因的前20多bp碱基应该加在第一个基因的终止密码子TAA的前面是后面啊？第一个基因的后20多bp个碱基加在第二个基因的ATG前面还是后面啊？ 因为我的两个基因都有启动子和终止子，我有点晕了
赞一下 回复此楼
4楼2012-11-06 10:45:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 15 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭