| 查看: 395 | 回复: 2 | ||
xulu2008金虫 (正式写手)
|
[求助]
感受态细胞
|
| 制作感受态细胞（用氯化钙法），有的资料是MgCl2-CaCl2溶液 ，有的是用只含CaCl2的溶液 ，到底哪个对呢？ |
回复此楼» 猜你喜欢
留学--博士招生
已经有16人回复
-
化学工程，本211，求调剂，ab区不限
已经有4人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有254人回复
-
湖北师范大学招调剂啦
已经有8人回复
-
邵阳学院食品与化学工程学院硕士调剂
已经有0人回复
-
天津商业大学 生物与医药课题组招生
已经有0人回复
-
生物化工学硕招收调剂
已经有0人回复
-
广东石油化工学院2026年硕士研究生需要多名生物，制药工程，食品专业的调剂生
已经有0人回复
-
317分 一志愿江南大学 化学工程学硕 求调剂
已经有6人回复
-
化工申博
已经有3人回复
cicelyzh
铁杆木虫 (职业作家)
- MolEPI: 10
- 应助: 1662 (讲师)
- 金币: 8693.8
- 红花: 72
- 帖子: 3516
- 在线: 456小时
- 虫号: 1614001
- 注册: 2012-02-13
- 专业: 生物化学
2楼2012-11-06 11:00:37
★ ★ ★
小丹木木: 金币+3, 鼓励交流 2012-11-06 17:22:51
小丹木木: 金币+3, 鼓励交流 2012-11-06 17:22:51
|
只要用氯化钙就行了，没那么严格的，给你的步骤就这样就行 1.从生长有大肠杆菌DH5α的平板上挑取一个单菌落，接种于2ml LB液体培养基中，37℃ 200r/min振荡培养过夜，作为一级种子。 2.将一级种子按1:50比例无菌转接到5ml LB液体培养基中，37℃ 200r/min振荡培养约2h-3h，至细菌的OD600达到0.5左右。 3.在无菌条件下将细菌转移到一个无菌的1.5ml Ep管中，冰浴30min。 4.4℃ 4000 r/min离心10min，弃上清。 5.加入1ml冰预冷的0.1mol/L CaCl2重悬沉淀，继续冰浴15min－30min。 6.4℃ 4000 r/min离心10min，弃上清。 7.沉淀中加入200μl用冰预冷的0.1mol/L CaCl2轻轻重悬。悬浮的感受态细胞可直接用于转化，若要保存，则需加入无菌甘油至终浓度为15%，分装100μl/管，-70℃保存备用。 |
3楼2012-11-06 11:42:20
10