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鉴定好的重组质粒转化BL21(DE3)后不长菌落已有1人参与
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| 连接产物转化DH5a后提取质粒，经过双酶切鉴定和PCR鉴定后都正确，可是将重组质粒转化表达细胞BL21(DE3)后，不长菌落。我做了四次重复，每次都只长两三个。之后我又将质粒转化DH5a，长得很密；又将pGEX-6p-1空载转化BL21(DE3)，长得也很密。操作没有问题，感受态没有问题。起初认为是否是目的蛋白有毒性，可转化BL21(DE3)pLysS后依然没有长。请教各位经验丰富的前辈能够给我指点迷津，不胜感激！ |
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3楼2012-11-25 15:43:27
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