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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 基因引物与内参引物
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Road2011

银虫 (小有名气)
引用回帖:
10楼: Originally posted by cicelyzh at 2012-11-08 07:49:47
如果扩增片段大小相差很多，反转录合成cDNA时较长的片段效率要低于小片段。进行qPCR时会造成一定的误差。...

扩增长度：目的基因引物的为135，内参基因引物的为270，这样的合适吗？谢谢
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11楼2012-11-08 13:04:18
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
11楼: Originally posted by Road2011 at 2012-11-08 13:04:18
扩增长度：目的基因引物的为135，内参基因引物的为270，这样的合适吗？谢谢...

如果有可能的话最好相差更少一些。这样也不是不可以做，只是对结果稍微有点影响。重选一对引物也不是什么难事吧。
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Road2011
12楼2012-11-08 14:38:26
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Road2011

银虫 (小有名气)
送鲜花一朵
引用回帖:
12楼: Originally posted by cicelyzh at 2012-11-08 14:38:26
如果有可能的话最好相差更少一些。这样也不是不可以做，只是对结果稍微有点影响。重选一对引物也不是什么难事吧。...

一般相差多少范围之内是更好呢？
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13楼2012-11-09 09:00:14
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
13楼: Originally posted by Road2011 at 2012-11-09 09:00:14
一般相差多少范围之内是更好呢？...

当然是越接近越好。但有时候根据不同基因的情况，无法设计成完全相同。一般差值控制在50bp以内。
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14楼2012-11-10 07:22:46
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scird

金虫 (小有名气)
这里有很多热心的童鞋
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15楼2013-01-17 11:25:11
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