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小小草儿

银虫 (正式写手)

[交流] 奇怪了?!精通UV-Vis即可见紫外分光光度法的虫友帮帮忙

在用UV-vis扫描二苯甲酮的庚烷溶液时发现一个奇怪的结果,请帮忙分析一下,
具体遇到的问题如下:
   我先用纯庚烷建立基线,然后扫描不同浓度的二苯甲酮/庚烷溶液,按理论上,一定的溶液,最大吸收峰位置应该不变,只是浓度不同,吸光度不同,但是,我得到的结果却不是!!!
    扫描1mM时,有三明显的峰(235nm,242nm,272nm);
    扫描0.4mM时,有两个明显的峰(234nm,242nm);
    扫描0.2mM时,有一个明显的峰(245nm左右);
    扫描0.08mM时,有一个明显峰(248nm);
    可看到这四种浓度下对应的峰都不一样。
    我又扫描了一个浓度较低但未知的二苯甲酮/庚烷溶液,扫描结果显示2个明显峰(228nm,257nm)。
    这是怎么回事呢?望高手指点。
    多谢了。

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SouthTwinkle

木虫 (小有名气)


小小草儿(金币+1):非常感谢!
这是因为你测试的浓度偏高的缘故。一般来说,分光光度法是适合ppm级的浓度分析的,你有没有注意到,当浓度为0.2mM(相当于200ppm),0.08mM(相当于80ppm)时就只有一个峰了,所以你必须将所测样品的浓度稀释到ppm级,才可能得到准确的结果,通常测试浓度在50ppm以下。

[ Last edited by SouthTwinkle on 2007-7-1 at 20:31 ]
欲将心事付瑶琴,知音少,琴断有谁听?
10楼2007-07-01 20:24:39
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xuhuisheng001

金虫 (正式写手)


小小草儿(金币+1):谢谢
浓度不同 对应的峰可能不同

比如 有可能发生 络合 等等反应

所以 要按照 标准曲线确定的浓度线性范围  配置供试品

[ Last edited by xuhuisheng001 on 2007-6-27 at 17:11 ]
我的qq:1256080237,希望大家加我好友,共同进步
2楼2007-06-27 17:09:32
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lizhenlin

木虫 (正式写手)


小小草儿(金币+1):谢谢
可能是二苯甲酮分子间形成氢键而络合了,你的浓度越大,最大吸收峰的峰数越多,
浓度减小时,形成氢键的能力减弱,峰数也比较稳定了
扫描0.2mM时,有一个明显的峰(245nm左右);
扫描0.08mM时,有一个明显峰(248nm);
你可以在0.2mM以下的浓度下进行检测

你也可以改用其他的溶剂来做,以减弱分子间的络合,这样建立标准曲线可能会更好一些

[ Last edited by lizhenlin on 2007-6-27 at 20:42 ]
没有人会记得你三天前做过什么的
3楼2007-06-27 20:39:45
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finesky

铁杆木虫 (著名写手)

上面两位解释的有道理,溶剂以及浓度对分子在溶液中的状态有很大影响,还是要好好查一下文献,仔细选择合适的浓度和溶剂
有机、无机非复合材料
4楼2007-06-27 20:56:29
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