24小时热门版块排行榜    

查看: 1014  |  回复: 9

小花木兰

银虫 (小有名气)

[求助] 难怪的问题

大肠杆菌发酵,为什么诱导后随时间变长,目标蛋白变少了,同时杂蛋白增加了,在凝胶上显示出来的。(诱导了25小时),菌体没有自溶,
回复此楼

» 猜你喜欢

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

weigh1111

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
时间太长了吧~25个小时了都~37度我一般诱导几个小时就差不多了,28度也只是过夜而已(16小时)
2楼2012-10-30 22:19:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
诱导可以摸索一下时间温度和诱导剂用量,会有好结果的。
流星来时我许了个愿,愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具,久不看论坛一来就提问者,宁弃EPI和VIP也不回帖。
3楼2012-10-31 18:52:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wwpjbnl

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
zhang8826857: 金币+3, 新虫加油 2012-11-07 13:40:26
大肠杆菌发酵,为什么诱导后随时间变长,目标蛋白变少了,同时杂蛋白增加了,在凝胶上显示出来的。(诱导了25小时),菌体没有自溶
  
呵呵,考虑一下诱导后随时间变长,是否已经超过了明白产物的合成时期。
我没有停止前行的脚步,因为有梦。。。。
4楼2012-11-02 16:55:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wwpjbnl

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

呵呵,考虑一下诱导后随时间变长,是否已经超过了目标产物蛋白的合成时期。
我没有停止前行的脚步,因为有梦。。。。
5楼2012-11-02 16:56:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yanlinchun

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

是不是你构建的菌株本底就高?
6楼2012-11-07 10:06:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小花木兰

银虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by yanlinchun at 2012-11-07 10:06:43
是不是你构建的菌株本底就高?

不是,菌株是老板回来的
7楼2012-11-11 20:23:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

d30314002

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


rainwander: 金币+1, 鼓励交流 2012-12-27 15:24:26
我先前做大肠杆菌高密度发酵时出现过这种情况,你用的什么抗生素,有可能是时间太长,抗生素失效,菌体质粒丢失。
8楼2012-12-26 13:55:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小花木兰

银虫 (小有名气)

引用回帖:
8楼: Originally posted by d30314002 at 2012-12-26 13:55:35
我先前做大肠杆菌高密度发酵时出现过这种情况,你用的什么抗生素,有可能是时间太长,抗生素失效,菌体质粒丢失。

卡那霉素
9楼2012-12-26 20:40:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

d30314002

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


rainwander: 金币+1, 鼓励交流 2012-12-27 15:24:19
我之前用的是氨苄,卡娜没用过,电泳目的条带变浅,杂蛋白变深,有很大可能是丢失质粒的菌在后期占了优势,因此时间越长,杂蛋白越多,目的蛋白越少。你可以考虑下这个方面
10楼2012-12-26 23:15:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 小花木兰 的主题更新
信息提示
请填处理意见