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蛇蝎男

铜虫 (著名写手)

[求助] 无菌滤液的制备

做抑菌试验,需要制备拮抗菌解淀粉芽孢杆菌的无菌滤液。将发酵液8000r/min,20min的离心处理,再取上清液用0.22um的过滤头去菌体。为什么将自认为的无菌滤液进行平板试验的时候还有菌体出现?求大神指点,谢谢!
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蛇蝎男

铜虫 (著名写手)

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5楼: Originally posted by 令狐冲_小熊 at 2012-10-29 09:08:42
应该是细节原因 针管、滤头是不是无菌,要用121度、30分钟先灭菌,还要操作要在超净工作台进行,注意手或手套上的脏物 最好要一次性的无菌手套

这个我做了啊  一定是无菌的啊  
6楼2012-10-29 10:08:32
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蛇蝎男

铜虫 (著名写手)

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4楼: Originally posted by laozuzunzhe at 2012-10-29 08:46:00
用10000rpm离心试试,注意无菌操作。

嗯 谢谢 我试试
7楼2012-10-29 10:08:56
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蛇蝎男

铜虫 (著名写手)

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3楼: Originally posted by 5202wangmin at 2012-10-29 08:41:43
估计是过滤头使用不当

不是用注射器连接过滤头然后推射吗?
8楼2012-10-29 10:09:28
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蛇蝎男

铜虫 (著名写手)

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2楼: Originally posted by zhangxingc at 2012-10-29 08:41:29
查一下孢子的大小,是不是0.22um的滤菌器不能将其滤掉

嗯 如果不能过滤掉的话,应该用什么方法去除呢?
9楼2012-10-29 10:10:05
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蛇蝎男

铜虫 (著名写手)

送鲜花一朵
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10楼: Originally posted by xhwhite313 at 2012-10-29 15:38:15
1、所用器具是否全部进行灭菌,如接受过滤后上清液的容器;过滤环境及操作是否满足无菌;
2、平板试验是否有空白对照,已考察0.22um过滤器是否真正有过滤除菌效果;(进口滤器可以无须进行性能测试,但国产滤器或国 ...

无菌是可以保证的。过滤器用的是国产的,现在改成进口的试试。同时去查找相关文献和资料。
谢谢您的回复。
11楼2012-10-29 15:49:15
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