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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 无菌滤液的制备
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蛇蝎男

铜虫 (著名写手)

[求助] 无菌滤液的制备

做抑菌试验，需要制备拮抗菌解淀粉芽孢杆菌的无菌滤液。将发酵液8000r/min,20min的离心处理，再取上清液用0.22um的过滤头去菌体。为什么将自认为的无菌滤液进行平板试验的时候还有菌体出现？求大神指点，谢谢！
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1楼 2012-10-29 08:12:24
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zhangxingc

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
查一下孢子的大小，是不是0.22um的滤菌器不能将其滤掉
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IwanttoaccompanyyoumorethanyouknowbutIcann't
2楼2012-10-29 08:41:29
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5202wangmin

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
估计是过滤头使用不当
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食品科学
3楼2012-10-29 08:41:43
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laozuzunzhe

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
用10000rpm离心试试，注意无菌操作。
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4楼2012-10-29 08:46:00
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令狐冲_小熊

铁杆木虫 (著名写手)

城户纱织

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
scelab: 金币+2, good 2012-10-29 09:20:47
应该是细节原因 针管、滤头是不是无菌，要用121度、30分钟先灭菌，还要操作要在超净工作台进行，注意手或手套上的脏物 最好要一次性的无菌手套
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5楼2012-10-29 09:08:42
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蛇蝎男

铜虫 (著名写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 令狐冲_小熊 at 2012-10-29 09:08:42
应该是细节原因 针管、滤头是不是无菌，要用121度、30分钟先灭菌，还要操作要在超净工作台进行，注意手或手套上的脏物 最好要一次性的无菌手套

这个我做了啊  一定是无菌的啊  
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6楼2012-10-29 10:08:32
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蛇蝎男

铜虫 (著名写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by laozuzunzhe at 2012-10-29 08:46:00
用10000rpm离心试试，注意无菌操作。

嗯 谢谢 我试试
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7楼2012-10-29 10:08:56
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蛇蝎男

铜虫 (著名写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 5202wangmin at 2012-10-29 08:41:43
估计是过滤头使用不当

不是用注射器连接过滤头然后推射吗？
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8楼2012-10-29 10:09:28
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蛇蝎男

铜虫 (著名写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by zhangxingc at 2012-10-29 08:41:29
查一下孢子的大小，是不是0.22um的滤菌器不能将其滤掉

嗯 如果不能过滤掉的话，应该用什么方法去除呢？
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9楼2012-10-29 10:10:05
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xhwhite313

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
1、所用器具是否全部进行灭菌，如接受过滤后上清液的容器；过滤环境及操作是否满足无菌；
2、平板试验是否有空白对照，已考察0.22um过滤器是否真正有过滤除菌效果；（进口滤器可以无须进行性能测试，但国产滤器或国产0.22um滤膜必须进行）
3、上述2条全部满足无菌条件后，那只能证明上清液里还有0.22um滤器无法过滤掉的成份。这种情况得你自己再去查询文献及资料，重新选定过滤器的尺寸大小。
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蛇蝎男
http://emuch.net/bbs/viewthread.php?tid=5429774&page=1&fpage=
10楼2012-10-29 15:38:15
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