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yaosl2011

银虫 (正式写手)

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[求助] 花色苷抑制胰脂肪酶活性的测定方法

我正在做关于花色苷抑制胰脂肪酶活性的实验，用的方法为分光光度法，实验做了几次，但每次的实验结果都不一样，脂肪酶的抑制率和花色苷的浓度之间无任何关系，搞的我相当郁闷。现有几个问题想请大家解答：
1、能否用分光光度法测定花色苷对胰脂肪酶活性的影响？在该实验中，花色苷的浓度太大会不会不适应于该方法？花色苷浓度过大呈现深紫色，而产物为黄色，花色苷浓度过大会不会掩盖住产物，使该方法失效？已知反应条件为pH8.0，在pH8.0下，花色苷呈现紫色，反应底物为PNPP，产物为PNP，在405nm下测定吸光度来确定抑制率，但花色苷在405nm下也有吸收，花色苷会不会对吸光度产生影响？实验设计如图，请问该实验设计和抑制率计算公式可行否？
2、文献中有提及用分光光度法测定原花青素的报道，其浓度设定比较低，是不是花色苷的浓度对测定结果影响太大？如果调低浓度该方法能不能适用？最近做了几次实验都不顺利，还请大家一起解答，先行谢过了！！！

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