应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 层析技术
51/1返回列表
查看: 592  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

761429495

新虫 (小有名气)

[求助] 层析技术

各位大侠们，我的木聚糖酶家族基因在毕赤酵母里面已经表达了，但是酶活和蛋白含量都比较低，我可以直接上离子柱和凝胶柱纯化 还是 说要对重组毕赤酵母的发酵条件进行优化呢？有知道的童鞋，指导我一下哈，十分感激呢
回复此楼

» 猜你喜欢
每一个让你讨厌的现在，都有一个不努力的曾经。
1楼 2012-10-26 13:52:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

linxt2005

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

可以挑取多一些单克隆进行表达测试，看能否挑到高表达的菌株，如果上罐的话，优化的周期会比较长。
我觉得可以先纯化一下，毕竟表达出来的浓度是比较低，一般能做个活性的定性分析就好了，只要确认了有活性，
经过纯化来浓缩，也是一个行之有效的方案。
赞一下 回复此楼
小兵一个
5楼2012-10-31 09:04:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答

aloon111

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你的目的是什么？如果是想得到更多的酶，可以先优化，优化后还是产量低，那你要考虑你的载体了。
赞一下 回复此楼
汇天下之贤
2楼2012-10-27 10:25:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
这要看你最终需要多少目的活性蛋白。计算一下目前的产量和活性是否可以满足需要。当然，做优化是很重要的，提高产率可以使后面的纯化工作更加轻松。
赞一下 回复此楼
3楼2012-10-28 04:28:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Freya小何

金虫 (小有名气)

Daisy

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
zhang8826857: 金币+1, 鼓励交流 2012-10-28 19:23:11
发酵条件进行优化，还是很有必要的，从发酵时间、发酵温度、发酵底物等进行优化，然后设置一个正交实验提高产率，纯化的时候蛋白含量高一些，容易纯化。
赞一下 回复此楼
每天都要进步一点点
4楼2012-10-28 09:21:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭