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后悔无期

金虫 (小有名气)

[求助] RNA提取,常温离心机离心1小时,还能提出来么?

RNA提取,要求离心机13000r/min离心1小时,因为没有4度离心机,只能用常温离心,这样还能提出来么?对离心机来说,这么长工作时间,对以后的使用是否有影响?
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zhwenxing

木虫 (著名写手)

尛森蟲

★ ★
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-10-24 13:53:25
引用回帖:
7楼: Originally posted by 后悔无期 at 2012-10-24 11:52:44
嗯,谢谢你!
1、我们提的是一种树的RNA,用了很多方法,都还没提出来。
2、由于是两个人做一个实验,partner搜到的方法,就用来试试了!
3、逆转录,之后是用来克隆基因。
4、我指的是离心机,如果这次能提出 ...

1、树的?哪种组织?树叶吗?根尖?某个部位?选择合适的提取剂。
2、多看看冷泉港的protocol。
3、离心机没那么娇气,先检查一下转头上的离心管眼里有没有异物,再就是配平好,尽管离心就是了。我们的天天满负荷的用啊用,好几年了,这不嗡嗡的狂转么,O(∩_∩)O哈哈~
9楼2012-10-24 13:36:27
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查看全部 16 个回答

aloon111

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
估计很难,离心机工作1 个小时,机器会发热。
汇天下之贤
2楼2012-10-24 09:48:07
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pys5003

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励应助 2012-10-24 13:53:12
离心机一般是用来分离,比重有差别的混合体是的不同物质或成分,如果要求是4度,而你用常温,这可能有些成分温度高了就溶解了,而其比重的差别也消失了。从而无法分离出目标物质。
3楼2012-10-24 10:02:14
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zhwenxing

木虫 (著名写手)

尛森蟲

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
后悔无期: 回帖置顶 2012-10-24 11:53:26
小丹木木: 金币+3, 鼓励应助 2012-10-24 13:53:02
后悔无期: 金币+3, ★★★很有帮助 2012-10-24 20:49:33
1、我们的冷冻离心机自从坏掉以后,提取动物、植物、细菌、真菌的RNA都是用常温的。
2、上述提取中,从来没有哪一步需要1h的离心哦。
3、温度过高会影响RNA的产率和纯度,有时候掺杂蛋白,看下游实验的需求。
4、 楼主最后一句话是指对离心机不好还是对样品不好?对离心机没事,样品会受影响。
5、实在不好借用其他实验室的情况下,摸索一把,把离心时间改为15min即可。
4楼2012-10-24 11:05:15
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