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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药代动力学 » 药动学大鼠取血及检测问题
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keyyuen

新虫 (初入文坛)

[求助] 药动学大鼠取血及检测问题

各位大侠,小弟准备做一中药复方灌胃药动学实验.
由于实验室资源有限,所以只能采用液相-紫外检测器,因此灵敏度不如液质联用
因此小弟正在烦恼,大鼠每次眼眶取0.5ml血取9-12个点的话
一来其实难度还是挺大的,二来分离出来大概200uL的血浆,血药浓度太低,怕达不到定量限.
如果每条曲线增加老鼠数量来增加取血量,又怕发文章的时候不给承认,而且个体差异也较大,各位大侠能帮帮小弟想想办法么?
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1楼2012-10-20 00:14:25
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keyyuen

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 涂亮星1 at 2012-10-29 16:32:38
怕血药浓度太低，你可以将蛋白分离后，将含药部分浓缩，这样药物浓度也会增加

我是先用乙酸乙酯提取,然后氮气吹干,最后甲醇复溶后,高速离心取上清进样的,这样应该也就是浓缩了吧?
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7楼2012-10-30 19:58:33
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staffyujay

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

液相的话200ul的血浆用600ul乙腈沉淀之后挥干，20ul流动相复溶，10ul进样品，这个还到你的定量下限？
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10楼2013-02-05 17:01:04
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伯爵

木虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
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xiaoxiao270: 金币+1, 3Q 2012-10-26 08:08:54
增大喂药剂量。处理血液时，尤其沉降蛋白时多测几个方案，提高回收率。一般一个取血点真少三只以上的，七只都是可以的，每个点大鼠越多越好，这个不用担心。
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2楼2012-10-22 08:58:34
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keyyuen

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 伯爵 at 2012-10-22 08:58:34
增大喂药剂量。处理血液时，尤其沉降蛋白时多测几个方案，提高回收率。一般一个取血点真少三只以上的，七只都是可以的，每个点大鼠越多越好，这个不用担心。

你的意思是每个点多加几只老鼠吗?
我看药动学研究的要求,说要6个样本组以上,然后求平均
那应该是说6条曲线6只老鼠取10个点吧?
请问您是这个意思吗?
还是说每条曲线每个点用多只老鼠来做?
这样成本会增大很多吧?
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3楼2012-10-22 09:48:47
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伯爵

木虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
xiaoxiao270: 金币+1, 3Q 2012-10-26 08:09:01
就一条血药浓度曲线，是每个点多取几只大鼠的血浆或血清，喂药时平行给三只以上的大鼠口服或注射（文献上多为6只），每一个取血时间点同时取这些大鼠的血，处理方法全是平行做，最后测定其中药物量的时候表示为 n只大鼠血药浓度的平均含量±SD值。我的意思主要是希望 1、你喂药的剂量大一点，喂的量大这样你的液相可以检测到它的含量，否则浓度太低，你的检测线达不到要求；2、还有就是大鼠多喂几只，这只没有测到，另一只测到了的话，你的实验还是可以继续的。
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4楼2012-10-24 22:49:30
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keyyuen

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 伯爵 at 2012-10-24 22:49:30
就一条血药浓度曲线，是每个点多取几只大鼠的血浆或血清，喂药时平行给三只以上的大鼠口服或注射（文献上多为6只），每一个取血时间点同时取这些大鼠的血，处理方法全是平行做，最后测定其中药物量的时候表示为 n只 ...

嗯嗯.明白.感谢你的意见!
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5楼2012-10-25 23:14:40
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匿名

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6楼2012-10-29 16:32:38
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匿名

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8楼2012-10-30 20:45:05
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zlfok00

新虫 (小有名气)
同意六楼观点，我现在做的方法就是200ul血浆，处理后100ul甲醇复溶，能有效降低检测限，只不过我用的是液质…
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9楼2012-11-05 21:19:14
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